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PPV 細(xì)小病毒抗體檢測(cè)試劑盒
荷蘭賽迪診斷公司
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PPV 細(xì)小病毒抗體檢測(cè)試劑盒
(以試劑盒內(nèi)的英文說明書為準(zhǔn))
一、簡(jiǎn)介
細(xì)小病毒(PPV)是單鏈DNA病毒,屬于細(xì)小病毒科,該病毒在豬群中廣泛感染,導(dǎo)致豬的再生障礙,也是給*種豬造成巨大經(jīng)濟(jì)損失的疫病之一。病毒可通過胎盤垂直傳播,可導(dǎo)致胎兒死亡、木乃伊胎、死產(chǎn)、流產(chǎn)等。但是,PPV是否感染依賴于妊娠階段母豬的免疫學(xué)狀態(tài)。在無免疫力時(shí),妊娠的前35天感染PPV可導(dǎo)致胎兒死亡;大約70天之后胎兒有免疫能力時(shí),可以對(duì)PPV產(chǎn)生免疫應(yīng)答從而避免感染,常見于PPV抗體陽(yáng)性小豬。
疫病確診依靠PPV的分離,血清學(xué)方法也可用于診斷。本試劑盒基于雙抗夾心ELISA原理診斷血清中的抗PPV抗體。
二、參考文獻(xiàn)
1. F. Westenbrink, M.A. Veldhuis and J.M.A. Brinkhof. An enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies to porcine parvovirus. Journal of Virological Methods, 23 (1989): 169-178.
2. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)豬細(xì)小病毒抗體的研究,病毒學(xué)方法雜志,23(1998):169-178
三、應(yīng)用
本試劑盒用于檢測(cè)血清標(biāo)本中的抗PPV抗體,可用于豬感染PPV的診斷。感染7天后即可檢測(cè)到特異性抗體,感染10天后抗體滴度可達(dá)到穩(wěn)定水平,檢測(cè)效果更佳。
采用檢測(cè)感染不同時(shí)期雙份血清標(biāo)本的方法,可以更為準(zhǔn)確的判斷PPV的感染情況。母豬的流產(chǎn)、死胎和不孕說明其可能感染了PPV。
四、 原理
先把稀釋的血清和PPV抗原混合,孵育,如果血清中有抗體會(huì)同抗原發(fā)生反應(yīng);之后混合液被加入到抗體包被的檢測(cè)板上,孵育,體系中游離的PPV抗原結(jié)合到板孔上,但之前加入的抗原已經(jīng)同血清中的抗體形成了免疫混合物,不能結(jié)合到板孔上;通過洗板,未結(jié)合的物質(zhì)都被洗掉,隨后加入的試劑結(jié)合到抗原上;孵育后再洗板,加入底物TMB,在過氧化物存在時(shí)發(fā)生顯色反應(yīng),表明血清中沒有抗PPV抗體,當(dāng)沒有顯色反應(yīng)時(shí)證明血清中有抗PPV抗體。
本試劑盒是單稀釋試驗(yàn)。血清樣品在1:5稀釋后檢測(cè),包括兩個(gè)對(duì)照血清,對(duì)照血清1為陽(yáng)性對(duì)照,抑制率≥50%,血清2為陰性對(duì)照,抑制率<50%。
五、試劑盒成分
1. 2塊酶標(biāo)板,2 test strip plates in a re-sealable aluminium foil bag
2. 2瓶?jī)龈煽乖?/span>2 vials lyophilized antigen
3. 1瓶濃縮酶標(biāo)結(jié)合物,1 vial conjugate (concentrated)
4. 1瓶陽(yáng)性對(duì)照血清,1 vial reference serum 1 (positive control)
5. 1瓶陰性對(duì)照血清,1 vial reference serum 2 (negative control)
6. 1瓶?jī)龈神R血清,1 vial lyophilized horse serum
7. 1瓶濃縮稀釋緩沖液, 1 vial dilution buffer (concentrated)
8. 1瓶底物液(直接使用),1 vial chromogen / substrate solution (ready-to-use)
9. 1瓶終止液(直接使用),1 vial stop solution (ready-to-use)
10. 1瓶濃縮洗液,1 vial washing fluid (concentrated)
11. 1瓶去離子水, 1 vial demineralized water
12. 1個(gè)孵育使用的蓋子,1 lid to cover the strips during incubation