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技術(shù)文章

幸福瞬間,滬鼎與您分享ELISA試劑盒制備的那些事

閱讀:1011          發(fā)布時(shí)間:2018-8-9

  晨曦徐徐拉開了帷幕,又是一個(gè)絢麗多彩的早晨,帶著清新降臨人間。在這個(gè)美好的早晨,上海滬鼎為您分享ELISA試劑盒的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化的那些事,了解它對(duì)你有益無(wú)害哦!
  我公司代理供應(yīng)的RD、TSZ、BIM品牌ELISA試劑盒已經(jīng)遠(yuǎn)銷全國(guó)各地,主要用于實(shí)驗(yàn)室科研使用。我公司試劑盒優(yōu)勢(shì):先進(jìn)、完善、穩(wěn)定,提供免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)。
  在實(shí)驗(yàn)條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的A值后,計(jì)算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽(yáng)性(positive),而是病(patient)的縮寫,不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA試劑盒中,有些作者定出S/N為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。
  實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。陽(yáng)性判定值(cut-off value)一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。ELISA試劑盒用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定,陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的。
  現(xiàn)舉某種檢測(cè)HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后,先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NCX)和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX;如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍,則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算: 
  陽(yáng)性判定值=NCX+0.05 標(biāo)本A值>陽(yáng)性判定值的為陽(yáng)性,小于陽(yáng)性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,ELISA試劑盒而不是對(duì)各種試劑均可通用。
  上海滬鼎生物由資深專家?guī)ь^組建研發(fā)團(tuán)隊(duì),十幾年ELISA試劑盒開發(fā)經(jīng)驗(yàn),品質(zhì)保障,值得信賴;BIM品牌度高,國(guó)內(nèi)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,如北京生命科學(xué)研究所,中國(guó)科學(xué)院,協(xié)和醫(yī)科大學(xué)等;諸多刊物的文章廣泛引用,如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等,目前SCI文章及國(guó)內(nèi)核心期刊引用已達(dá)數(shù)百篇。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供完備的售前及售后服務(wù),確保您實(shí)驗(yàn)成功!

                     

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