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技術(shù)文章

ELISA技術(shù)與自動(dòng)化

閱讀:797          發(fā)布時(shí)間:2021-9-16

在一般的概念里,ELISA技術(shù)的可操作性強(qiáng),不需復(fù)雜設(shè)備,甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng),盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度等觀念的不斷改進(jìn),解決ELISA技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的系統(tǒng)誤差問(wèn)題及高效率運(yùn)作問(wèn)題導(dǎo)致了自動(dòng)化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的科學(xué)地、有機(jī)地、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動(dòng)化ELISA技術(shù)的理論基礎(chǔ)。


在自動(dòng)化ELISA技術(shù)中,可以將整個(gè)體系分成加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)及判讀系統(tǒng)、機(jī)械臂系統(tǒng)、液路動(dòng)力系統(tǒng)及軟件控制系統(tǒng)等幾種結(jié)構(gòu),這些系統(tǒng)既獨(dú)立又緊密聯(lián)系。加樣系統(tǒng)包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤、試劑架及加樣臺(tái)等構(gòu)件。加樣針有兩手中,一為有TEFLON涂層的金屬針,另一為可更換的一次性加樣頭(Tip) 。有些儀器的加樣針只配金屬針,無(wú)一次性加樣頭,有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑,它是靠液路動(dòng)力系統(tǒng)提供動(dòng)力,通過(guò)注射器樣的分配器進(jìn)行精確加樣的。加樣針的數(shù)量在各型號(hào)儀器上是不同的,有一根的、兩根的或多根的。條碼閱讀器是幫助識(shí)別標(biāo)本的重要工作,目前的儀器均配有此裝置。樣品盤除了放置標(biāo)本外,還能放置稀釋標(biāo)本用的稀釋管,供不同檢測(cè)目的使用。試劑架是供放置酶標(biāo)記試劑、顯色液、終止液等試劑用的,有些型號(hào)的儀器這一部分是獨(dú)立的,有些是并在樣品盤上。加樣臺(tái)是酶標(biāo)板放置的平臺(tái),有些儀器在臺(tái)上設(shè)置溫育裝置,讓溫育在臺(tái)上進(jìn)行。整個(gè)加樣系統(tǒng)由控制軟件進(jìn)行協(xié)調(diào)操作。


溫育系統(tǒng)主要由加溫器及易導(dǎo)熱的金屬材料板架構(gòu)成。有些是盒式的,有些是臺(tái)式的。一般控制的溫度可在室溫- 50°C之間。溫育時(shí)間及溫度設(shè)置是由控制軟件需確調(diào)控的。


洗板系統(tǒng)是整個(gè)體系的重要組成部分,主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項(xiàng)洗板的洗板殘留量一般控制在5µL以內(nèi)。最好設(shè)備可控制在2µL內(nèi)。洗板次數(shù)可通過(guò)軟件控制實(shí)現(xiàn)并可更改次數(shù)。


讀板系統(tǒng)由光源、激光片、光導(dǎo)纖維、鏡片和光電倍增管組成,是酶促反應(yīng)最突結(jié)果客觀判讀的設(shè)備。各型號(hào)儀器的比色探頭配置不一樣,有單頭的3也有8頭的??刂栖浖ㄟ^(guò)機(jī)械臂和輸送軌道將酶標(biāo)板送入讀板器進(jìn)行自動(dòng)比色,再將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù)信號(hào)又回送到軟件系統(tǒng)進(jìn)行分析,最終得出結(jié)果。


酶標(biāo)板的移動(dòng)靠機(jī)械臂或軌道運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)完成。機(jī)械臂的另一重要功能是移動(dòng)抽樣針。機(jī)械系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)受控子控制軟件,其運(yùn)動(dòng)非常地精確和到位。

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