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技術(shù)文章

elisa試驗中顯色淡靈敏度偏低問題防止辦法

閱讀:2863          發(fā)布時間:2013-6-7

elisa試驗中顯色淡靈敏度偏低問題防止辦法

 我們在做實驗時,常會遇到elisa試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問題,以下是根據(jù)不同問題可能原因及其防止方法總結(jié),僅供參考:
可能原因

1.孵育反應(yīng)時間不足
  防止方法
定時鐘準(zhǔn)確定時
 
 可能原因
2.洗滌時沖擊力太大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數(shù)增加
  防止方法
減少洗滌沖擊力,按說明書要求保留洗滌時間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)
 
 可能原因
3.顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入
  防止方法
滴加顯色液時,滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,反加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
 
 可能原因
4.顯色劑反應(yīng)時間不足
  防止方法
準(zhǔn)確定時
 
 可能原因
5.蒸餾水水質(zhì)有問題
  防止方法
測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響
 
6.試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高
 防止方法
 試劑盒置保溫箱內(nèi)運輸,并放足夠數(shù)量的冰塊,盡量縮短運輸時間
 
 可能原因
7.試劑、樣品用前未能平衡
  防止方法
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右
 可能原因
 可能原因
8.樣品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反應(yīng)
 防止方法
 樣品不能加 NaN 3 防腐
9.試劑盒超過有效期
  防止方法
超過效期試劑盒不要使用
 
 
 可能原因
10.試劑開啟時間過長長菌
  防止方法
試劑開啟后請盡量在短時間內(nèi)用完
 
 可能原因
11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔
 校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。

 防止方法
移液不宜過快,排放應(yīng)*。吸頭內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
 
 可能原因
12.恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃)
  防止方法
放入反應(yīng)板時注意培養(yǎng)箱溫度,及時調(diào)整,孵育反應(yīng)期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。
以上十二種方法是我們在實驗過程中所遇到的,并不全面,僅供大家參考,我司所售elisa試劑盒,生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品均提供技術(shù)指導(dǎo),試劑盒免費代測,咨詢訂購產(chǎn)品。 

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