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滬鼎詳解細胞培養(yǎng)實驗問題的解決方案

我們在售后技術(shù)服務(wù)中，經(jīng)常接到客戶向我們詢問關(guān)于細胞培養(yǎng)常見問題，為方便客戶實驗順利，我司經(jīng)技術(shù)部確定，特對細胞培養(yǎng)問題做出詳細解答。希望在實驗中幫到大家，上海滬鼎的宗旨：以顧客為上帝，真誠為大家服務(wù)，上海滬鼎，您身邊的試劑專家.

1.倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？
倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
2.接收到的凍存細胞該如何處理？
收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
3.有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)？
推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
4.原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？
細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. （1987）. Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. （New York, Alan R. Liss, Inc.）]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
5.當我*次植入正常人類細胞時需要旋轉(zhuǎn)細胞去除二甲基亞楓嗎？
*次植入正常凍存細胞時，我們不推薦旋轉(zhuǎn)去除二甲基亞楓。離心過程比殘留二甲基亞楓對細胞的傷害更大，尤其是不正當?shù)母咚傩D(zhuǎn)。我們的經(jīng)驗是如果二甲基亞楓的濃度很低，細胞不會受毒害。如果你將1ml細胞植入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中，二甲基亞楓的濃度將小于0.67％，沒有發(fā)現(xiàn)負面影響。實際上，如果細胞的接種密度為每平方厘米5000-10000，二甲基亞楓的濃度很低。
6.多久更換一次培養(yǎng)基？
一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入凍存的細胞后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。
7.凍存的細胞該如何開始培養(yǎng)？
⑴將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
⑵用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮，然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
⑸用70％的酒精沖洗小管，然后擦去多余酒精。
⑹打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
⑺平衡管內(nèi)物，用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶（多數(shù)細胞用T-75的培養(yǎng)瓶）。多數(shù)細胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細胞。
⑻蓋好蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中（37℃,5%CO2,95%空氣）
⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
上海滬鼎生物科技有限公司產(chǎn)品涵蓋了ELISA試劑盒、生物試劑、進口血清、培養(yǎng)基、抗體、進口標準品等，產(chǎn)品以*的質(zhì)量、zui高的一致性以及*的性能來滿足您的科研實驗需求。

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