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滬鼎教您正確操作小鼠β淀粉樣蛋白elisa試劑盒實驗

閱讀:837          發(fā)布時間:2014-4-22
提 供 商 上海滬鼎生物科技有限公司 資料大小 93KB
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品牌:RD TSZ

規(guī)格:96T 48T
:葉()
保存:;2-8℃。
有效期:6個月
供應商:上海滬鼎生物科技有限公司

1、標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
1000μg/L    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
500μg/L    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
250μg/L    3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
125μg/L    2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
62.5μg/L    1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4、配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
    應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品濃度。 
    清明剛一過,五一又迎來,上海滬鼎生物新品“小鼠elisa試劑盒”已隆重上市!我公司代理美國RD、TSZ等ELISA試劑盒,規(guī)格:48T/96T,訂購或了解本新品,歡迎您。

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