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技術文章

各類真菌培養(yǎng)基的詳細介紹及用法

閱讀:3875          發(fā)布時間:2017-2-6

                各類真菌培養(yǎng)基的詳細介紹及用法
一、沙保羅瓊脂培育基

[用處]

供真菌及酵母樣真菌的別離培育用.

[配法]

麥芽糖40g,蛋白胨10g,瓊脂20g,蒸餾水1L.              

將上述成分溶于水,加熱溶解,調pH至6.0±0.2,分裝三角瓶或試管中,118℃滅菌15min,傾瀉平板或置斜面,無菌試驗后備用.

[用法]

將標本接種培育基,如系血液標本,則采納1~2ml,與冷卻至45℃擺布沙保瓊脂混合,傾瀉接種平板.分別置35℃和25℃恒溫箱內一起培育.35℃培育48h,25℃需連續(xù)培育5天,逐日調查成果.發(fā)現(xiàn)真菌及酵母樣可疑菌落,轉種沙保菌斜面,取得純培育后進行判定.

[質量操控]

白色念珠菌和新式隱球菌成長杰出.

注:

⑴ 本培育基如不參加瓊脂,即為沙保羅液體培育基,供真菌及念珠菌的增菌培育用.

增加氯霉素0.05~0.125mg/ml,可抑制細菌和污染的霉菌及隱球菌成長.此二種藥均耐熱,可直接參加培育基內高壓滅菌.

⑶ 增加酵母浸膏5mg/ml,可推進皮膚癬菌成長.增加維生素B 0.1mg/ml,可推進紫色癬菌和斷發(fā)癬菌成長.

⑷ 將麥芽糖削減到20g/L,為沙保羅20g/L麥芽糖瓊脂培育基,可供誘導真菌發(fā)生孢子用.

⑸ 該培育基呈酸性,應進步20%的瓊脂用量.

二、玉米粉瓊脂培育基

[用處]

判定酵母樣真菌用.白色念珠菌在該培育基上25℃24h培育可長出假菌絲,頂端有典型的厚壁孢子,可與其它念珠菌辨別.

[配法]

玉米粉4g,瓊脂粉8g,蒸餾水1L

(pH6.0±0.2).

將細米粉加水浸泡數(shù)分鐘,扎緊瓶口,浸入60℃水浴4h,取出后用沙布過濾,除掉粗渣,補足水分.無須調整pH.參加瓊脂,煮沸溶解,有沉淀物再過濾1次,分裝試管,121℃滅菌15min備用.

用玻璃片法點種后,置平皿內,堅持必定濕度,置23~26℃下培育24~48h.取出玻片培育物,用高倍鏡調查真假菌絲和有無厚壁孢子.

[質量操控]

白色念珠菌(ATCC 26790)厚膜孢子陽性;新式隱球菌(ATCC 9763)厚膜孢子陰性.

注:

⑴ 玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉替代,作用一樣.

⑵ 該培育基參加10ml/L Tween-80,制成玉米粉Tween-80瓊脂,用處一樣,作用非常好.

 

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