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技術(shù)文章

端粒酶活性TRAP 實(shí)時定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

閱讀:4292          發(fā)布時間:2016-7-27

主要用途

   我公司端粒酶活性TRAP 實(shí)時定量檢測試劑是一種旨在運(yùn)用SYBR 綠色熒光染料作為標(biāo)記信號,結(jié)合端粒重復(fù)序列擴(kuò)增方法TRAP),既方便、快速地進(jìn)行各種DNA 模板的擴(kuò)增,又實(shí)時檢測定量分析擴(kuò)增產(chǎn)物,即端粒酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛應(yīng)用于腫  瘤、衰老等研究。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,無核酶污染,操作便捷,敏感,定量準(zhǔn)確,重復(fù)性強(qiáng),效果滿意,質(zhì)量保證。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為20 次PCR 反應(yīng)
2. 操作時,須戴手套
3. 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR 儀
4. 建議整個操作在4℃下進(jìn)行
5. 必須使用帶濾芯的槍頭
6. 所有器皿、離心管、液體等無RNA 酶污染
7. 使用時,避免污染母液
8. 建議使用裂解液或無離子水作為陰性對照
9. 根據(jù)用戶PCR 儀的性能,決定是否加入封隔液(Reagent E)
10. 配制完成后,即刻進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng),以確保反應(yīng)物的活性
11. 試劑避免反復(fù)凍融
12. 通常樣品量范圍為1.6 納克至1 微克;理想范圍為250 納克;如果沒有反應(yīng),可能樣品中存在PCR 抑制劑,建議調(diào)整樣品量為100 至200 納克
13. PCR 擴(kuò)增反應(yīng)的初3 個循環(huán)為定量基線;3 至15 個循環(huán)的熒光信號的10 倍值為熒光閾值;熒光信號達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct 值(參考圖像如下):其中6 號為陰性對照
14. Ct 值作為端粒酶活性的計(jì)量單位
15. 用戶可以使用293 細(xì)胞(10,100,和1000 細(xì)胞數(shù))作為陽性對照,以此建立標(biāo)準(zhǔn)曲線:橫座標(biāo)(X軸)為細(xì)胞量對數(shù),縱座標(biāo)(Y 軸)為Ct 值
16. 如果檢測卵細(xì)胞樣品,建議平均每個卵細(xì)胞使用5 微升裂解液(Reagent A)裂解細(xì)胞,孵育60 分鐘,取1/10 至1/20 的卵細(xì)胞量,進(jìn)行定量擴(kuò)增反應(yīng)

  本公司提供系列端粒酶活性檢測試劑產(chǎn)品

如:

   端粒酶活性TRAP實(shí)時定量檢測試劑盒

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