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快速型DNA建庫試劑盒

2019-6-20  閱讀(720)

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Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit

——快速型DNA建庫試劑盒



產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® 是針對(duì)lllumina®高通量測序平臺(tái)專業(yè)開發(fā)設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)座酶法建庫試劑盒。適用于1 ng/50 ng的基因組DNA、cDNA、擴(kuò)增子(>500 bp)等樣本的建庫。與常規(guī)分步法建庫相比,僅需10 min即可完成DNA片段化、末端修復(fù)和接頭連接過程,顯著縮短建庫時(shí)間,并獲得優(yōu)異的測序質(zhì)量。

產(chǎn)品原理
在Transposome Mix中包含由轉(zhuǎn)座酶和兩種等摩爾的接頭Adapter 1和Adapter 2構(gòu)成一個(gè)完整的轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座發(fā)生時(shí),該轉(zhuǎn)座子將Adapter 1和Adapter 2接頭序列插入靶基因中,形成一端帶有Adapter 1,一端帶有Adapter 2的DNA,之后利用DNA聚合酶將轉(zhuǎn)座形成的切口補(bǔ)齊。這種產(chǎn)物經(jīng)N5(N5XX)和N7(N7XX)以及P5和P7(PCR Primer Mix)兩對(duì)引物擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)分選和純化后即為可測序文庫。


產(chǎn)品特點(diǎn)
》》 操作簡便:一步法文庫構(gòu)建,一步完成片段化到接頭連接;
》》 適用范圍廣:適用不同來源不同GC含量的DNA樣本;
》》 極速建庫:單個(gè)文庫構(gòu)建僅90 min即可完成;
》》 產(chǎn)品穩(wěn)定:嚴(yán)格的批次性能與穩(wěn)定質(zhì)控。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1)簡便
本產(chǎn)品基于轉(zhuǎn)座酶法開發(fā),其核心原理是轉(zhuǎn)座酶及其轉(zhuǎn)坐機(jī)制。產(chǎn)品整個(gè)操作流程僅包括片段化、擴(kuò)增和純化過程,整體過程僅需 90分鐘,即可完成建庫。


2) 文庫質(zhì)量
使用Hieff NGS®  Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對(duì)1 ng嗜鹽桿菌gDNA(65% GC)樣本建庫,并分別使用1.0×磁珠進(jìn)行純化,0.8×/0.2×、0.7×/0.2×、0.5×/0.15×磁珠比例進(jìn)行文庫分選,均獲得高質(zhì)量文庫。

圖. Agilent 2100文庫質(zhì)量分析

3)測序質(zhì)量
使用Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®對(duì)不同GC含量的微生物gDNA樣本建庫,并使用HiSeq 4000測序,結(jié)果顯示:無論樣本起始量及GC含量,Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®所建文庫均獲得堿基質(zhì)量好且覆蓋度均一的測序數(shù)據(jù)。





圖 Input DNA為50 ng,PCR cycles為7,測序數(shù)據(jù)每個(gè)樣品1 G,對(duì)應(yīng)不同GC含量樣本的數(shù)據(jù)偏好性分析


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