聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機(jī)：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
在PCR技術(shù)的發(fā)展歷程中，熱啟動(dòng)技術(shù)的出現(xiàn)無(wú)疑是一次革命性突破。常規(guī)PCR技術(shù)在反應(yīng)體系配制階段，由于DNA聚合酶在低溫環(huán)境下已具備活性，極易與引物、模板發(fā)生非特異性結(jié)合，從而產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物和引物二聚體。這些“副產(chǎn)物"不僅干擾目標(biāo)產(chǎn)物的擴(kuò)增，還會(huì)嚴(yán)重降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性，導(dǎo)致后續(xù)數(shù)據(jù)分析出現(xiàn)偏差甚至錯(cuò)誤。
熱啟動(dòng)技術(shù)通過(guò)的溫度依賴性激活機(jī)制，從根源上解決了這一難題。在反應(yīng)體系配制時(shí)，借助物理或化學(xué)修飾手段，暫時(shí)“凍結(jié)"DNA聚合酶的活性，使其無(wú)法在低溫下啟動(dòng)擴(kuò)增反應(yīng)。直到反應(yīng)溫度升至特定閾值，聚合酶的活性才被精準(zhǔn)釋放，開(kāi)始特異性地識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)模板，進(jìn)行高效、準(zhǔn)確的DNA擴(kuò)增。這種精準(zhǔn)的溫度控制，規(guī)避了低溫環(huán)境下的非特異性條帶和引物二聚體的生成，顯著提升了PCR反應(yīng)的特異性。正因如此，熱啟動(dòng)PCR已成為提升PCR特異性的金標(biāo)準(zhǔn)，但傳統(tǒng)熱啟動(dòng)技術(shù)需針對(duì)特定DNA聚合酶篩選適配體或抗體，存在研發(fā)周期長(zhǎng)、操作繁瑣等局限。
<點(diǎn)擊查看大圖>
相比之下，引物封閉熱啟動(dòng)技術(shù)獨(dú)辟蹊徑，不再聚焦于聚合酶活性“凍結(jié)"，而是通過(guò)高親和性DNA結(jié)合蛋白精準(zhǔn)捕獲引物，從根本上突破了傳統(tǒng)技術(shù)依賴聚合酶修飾的桎梏。基于引物封閉原理，從源頭上阻斷引物間的錯(cuò)誤結(jié)合，解決傳統(tǒng)PCR中引物二聚體形成以及非特異性產(chǎn)物生成的難題。該技術(shù)既規(guī)避了復(fù)雜冗長(zhǎng)的篩選流程，又極大提升了熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用便捷性與反應(yīng)特異性，為PCR技術(shù)的高效、精準(zhǔn)應(yīng)用開(kāi)辟了新路徑。
圖1. 引物封閉熱啟動(dòng)技術(shù)在PCR擴(kuò)增技術(shù)中的原理圖示意[2]
性能展示
HotStart-Primer Binding Protein (Cat#14563)
翌圣生物全新研發(fā)的HotStart-Primer Binding Protein (Cat#14563)能夠在低溫下可與引物結(jié)合，將引物與Taq DNA聚合酶有效隔離，使其無(wú)法被聚合酶利用，從而高效抑制低溫條件下非特異性引物延伸產(chǎn)物及引物二聚體的形成，能夠顯著提升PCR反應(yīng)的特異性和擴(kuò)增效率。
有效抑制引物二聚體形成，提高檢出率
通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)評(píng)估翌圣生物HotStart-Primer Binding Protein與進(jìn)口品牌Supplier A同類產(chǎn)品對(duì)PCR反應(yīng)中引物二聚體的抑制效果。結(jié)果顯示，兩種產(chǎn)品均能有效減少引物二聚體形成，并顯著提高目標(biāo)序列的擴(kuò)增效率，表明熱啟動(dòng)蛋白技術(shù)可顯著改善PCR反應(yīng)特異性。
圖2. 翌圣HotStart-Primer Binding Protein提升PCR反應(yīng)特異性數(shù)據(jù)展示
新品，福利大放送！現(xiàn)開(kāi)放5個(gè)免費(fèi)試用名額，先到先得！只需掃描下方二維碼，聯(lián)系工作人員，即可輕松申領(lǐng)試用產(chǎn)品，開(kāi)啟高效科研之旅！
活動(dòng)細(xì)則：
1、活動(dòng)時(shí)間：即日起-6月30日；
2、活動(dòng)名額有限，每位客戶限一套。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) |
引物熱啟動(dòng)結(jié)合蛋白 | HotStart-Primer Binding Protein | 14563ES |
Taq酶雙封閉抗體 | Hieff® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody | 31303ES |
Taq酶 | Hieff UNICON UCF. ME® Advanced Hotstart Taq DNA Polymerase | 14321ES |
逆轉(zhuǎn)錄酶 | Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase | 14614ES |
熱敏UDG酶 | UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG), heat-labile | 14466ES |
鼠源RNase抑制劑 | UCF.ME® Murine RNase Inhibitor | 14672ES |
參考文獻(xiàn)：
[1] Paul N, Shum J, Le T. Hot start PCR[M]//RT-PCR Protocols: Second Edition. Totowa, NJ: Humana Press, 2010: 301-318.
[2] Kubu C J. HotStart-IT®: A novel hot start PCR method based on primer sequestration[J]. BioTechniques, 2008, 44(2): 275-277.
