聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
HEK293細胞在生物制藥領(lǐng)域的應用
HEK293細胞系是人胚胎腎細胞系，具有與人類細胞相似的翻譯后修飾系統(tǒng)，能夠生產(chǎn)出更接近天然人類蛋白的重組蛋白。其在生物制藥領(lǐng)域應用廣泛，尤其是在細胞和基因治療（CGT）產(chǎn)品生產(chǎn)中占據(jù)重要地位。許多治療性病毒載體，如慢病毒、腺相關(guān)病毒等，都在 HEK293 細胞中生產(chǎn)。隨著CGT領(lǐng)域的迅速發(fā)展，HEK293及其衍生細胞的應用前景將更加廣闊。
殘留DNA風險及法規(guī)監(jiān)管要求
WHO和各國藥物注冊監(jiān)管機構(gòu)均對生物制品中外源宿主DNA殘留提出了監(jiān)測和控制要求，以確保生物制品的安全性及質(zhì)量可控性。
WHO和美國FDA現(xiàn)行指導方針推薦成品中殘留DNA不高于10 ng/劑，美國FDA還指出生物制品宿主細胞DNA殘留DNA不高于100 pg/劑。歐洲藥典通則規(guī)定生物制品殘留DNA限度大多為不超過10 ng/劑。中國藥典2020年版三部規(guī)定，以細胞基質(zhì)生產(chǎn)的生物制劑外源宿主細胞DNA殘留量不能超過100 pg/劑，以細菌或真菌基質(zhì)生產(chǎn)的疫苗DNA殘留量不能超過10 ng/劑。
除需對DNA的殘留量進行控制外，DNA殘留片段大小分布也是確定其相關(guān)風險因素的重要指標。有研究表明，一個功能基因至少在200 bp以上，因此大于200 bp有可能會有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風險等級越高。
SV40LTA & E1A 殘留 DNA 的法規(guī)監(jiān)管要求
HEK293T細胞是HEK293細胞系的衍生物，通過表達一個溫度敏感的SV40大T抗原突變體而建立。SV40是一種致瘤病毒，其大T抗原（LTA）序列和腺病毒E1A序列具有潛在安全性風險。CDE（國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心）頒布的相關(guān)指導原則要求，對包裝病毒載體用細胞庫（如HEK293T細胞）攜帶的Adv E1A序列和SV40大T 抗原序列等具有潛在安全性風險的特定轉(zhuǎn)化序列，均應進行殘留控制。
HEK293相關(guān)殘留檢測解決方案
HEK293宿主殘留檢測
試劑盒線性范圍為：30fg/μL~300pg/μL，R2=1，擴增效率為100.45%，各濃度檢測值CV<15%。
圖 1.HEK293 DNA標曲線性圖（上）和擴增曲線線性圖譜（下）
HEK293宿主殘留片段分析
試劑盒含有四種不同長度的擴增片段：82 bp、133 bp、227 bp、515 bp，四片段線性范圍均為30 fg/μL~300 pg/μL，R2＞0.99，擴增效率在90%~110%之間，各濃度檢測值CV<15%。
圖2 .82 bp擴增曲線圖譜（上）和133 bp擴增曲線圖譜（下）
圖3 .227 bp擴增曲線圖譜（上）和515 bp擴增曲線圖譜（下）
SV40LTA & E1A 殘留檢測
SV40LTA線性范圍在1.8×101~1.8×105copies/μL，R2=1，擴增效率為100.25%，各濃度檢測值CV<15%；
E1A線性范圍在1.8×101~1.8×105copies/μL，R2=1，擴增效率為100.25%，各濃度檢測值CV<15%。
圖4 .SV40LTA擴增曲線圖譜（左）和E1A擴增曲線圖譜（右）
產(chǎn)品特點
符合法規(guī)：按照法規(guī)要求進行全面驗證，可提供驗證報告；
保障品質(zhì)：試劑盒原材料全自主研發(fā)，qPCR Mix等酶產(chǎn)品在超潔凈酶工廠生產(chǎn)；
精密度高：批內(nèi)重復性高，批間差異?。?/span>
專屬性強：特異性檢測不受其他外源基因組DNA干擾。
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
HEK293宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G) | 50T/100T | 41331ES |
HEK293宿主細胞殘留DNA片段分析試劑盒 | 4*50T/4*100T | 41316ES |
SV40LTA&E1A殘留DNA檢測試劑盒 | 50T/100T | 41310ES |
RCA (E1A)基因拷貝數(shù)檢測試劑盒 | 50T/100T | 41321ES |
