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試用 | SP6 VS T7 RNA聚合酶怎么選?一文解析高特異性轉(zhuǎn)錄秘訣

2025-7-9  閱讀(34)

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在生命科學(xué)研究領(lǐng)域,體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)正以蓬勃之勢快速發(fā)展,成為眾多科研項目及生物制藥研發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)支撐。在體外轉(zhuǎn)錄的復(fù)雜體系中,RNA聚合酶堪稱核心“主角",其以DNA為模板催化合成互補RNA分子的功能至關(guān)重要。T7、T3與SP6 RNA聚合酶均為常用工具酶,其中T7 RNA聚合酶因具備高效的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)能優(yōu)勢,被廣泛應(yīng)用于各類體外轉(zhuǎn)錄場景。而SP6 RNA聚合酶由于高度SP6啟動子序列識別特異性,在精準(zhǔn)轉(zhuǎn)錄方面展現(xiàn)出優(yōu)勢,其與T7 RNA聚合酶形成功能互補,共同為不同科研需求提供差異化解決方案。



圖1. SP6 RNA Polymerase體外轉(zhuǎn)錄流程圖[1]


SP6 RNA聚合酶是一種DNA依賴型的5'→3' RNA聚合酶,它能夠高度特異性地識別SP6啟動子序列,僅以SP6啟動子下游的DNA為模板,高效催化單鏈或雙鏈DNA SP6啟動子下游NTP(核苷酸三磷酸)的摻入,從而合成與模板DNA互補的RNA鏈。不僅如此,它還能兼容如生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記等修飾的NTP,為多樣化標(biāo)記RNA的合成提供了可能。憑借自身的特性,SP6 RNA聚合酶在科研與生物技術(shù)領(lǐng)域大顯身手,廣泛應(yīng)用于以下場景:

  • 制備放射性標(biāo)記的RNA探針

  • 體外轉(zhuǎn)錄制備mRNA疫苗

  • 制備基因編輯向?qū)NA

  • 制備siRNA、miRNA等小RNA

  • 合成RNA反義鏈,用于調(diào)控基因表達研究

  • 用于結(jié)構(gòu)、加工和催化性能研究的RNA





翌圣生物全新推出的SP6 RNA聚合酶,具有高效轉(zhuǎn)錄活性,且該產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染,確保實驗結(jié)果不受干擾。



性能展示

翌圣SP6 RNA Polymerase (Cat#14810)


高效轉(zhuǎn)錄:體外轉(zhuǎn)錄效果媲美進口品牌

圖2. 翌圣SP6 RNA Polymerase與進口品牌同類產(chǎn)品SP6 RNA Polymerase以帶有SP6 Promoter的線性化質(zhì)粒DNA為模板進行體外轉(zhuǎn)錄時的效果圖

注:分別添加不同酶活SP6 RNA Polymerase與0.1 μg帶有SP6 Promoter的線性化質(zhì)粒DNA為模板進行體外轉(zhuǎn)錄,37℃孵育2h,70℃孵育10min終止反應(yīng),加入2U DNase I (10325ES),37℃孵育15min消化模板DNA,得到的RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為248 nt。取出10 μL反應(yīng)產(chǎn)物,加入5μL 2 × RNA Loading Buffer,70℃變性10min,然后進行1%瓊脂糖凝膠電泳,用1X TAE作為電泳液,160V電泳20min,染色后拍照觀察結(jié)果。



無核酸外切酶、切口酶、非特異性核酸酶、RNase酶殘留

圖3. 翌圣SP6 RNA Polymerase核酸外切酶、切口酶、非特異性核酸酶、RNase殘留檢測結(jié)果

注:將SP6 RNA Polymerase分別與核酸底物孵育,并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結(jié)果表明,翌圣的3個批次SP6 RNA Polymerase均未檢測出核酸外切酶(100 U)、切口酶(100 U)、非特異性核酸酶(100 U)或RNase(20U)殘留,為您的實驗結(jié)果準(zhǔn)確性與可靠性保駕護航。


新品 ,福利大放送!現(xiàn)開放5個 試用名額,先到先得!只需掃描下方二維碼,聯(lián)系我們的專業(yè)工作人員,即可輕松申領(lǐng)試用產(chǎn)品,開啟高效科研之旅!

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

目錄價

活動價

SP6 RNA Polymerase (20 U/μL)

14810ES84

2000 U

439元

0元


活動細(xì)則:

1、活動時間:即日起-7月30日

2、活動名額有限,每位客戶限一套。


圖片



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貨號

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SP6 RNA Polymerase

14810ES

T7 RNA聚合酶

T7 RNA Polymerase GMP-grade (250 U/μL)

10625ES

CleaScrip™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA, 250 U/μL)

10628ES



參考文獻:

[1]Karikó K. Developing mRNA for therapy[J]. The Keio Journal of Medicine, 2022, 71(1): 31-31.

[2]Krieg P A, Melton D A. [25] In vitro RNA synthesis with SP6 RNA polymerase[M]//Methods in enzymology. Academic Press, 1987, 155: 397-415.



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