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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
46007ES01JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 46007ES01 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1617更新時(shí)間：2022-11-07 16:11:22
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 46007ES01 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 |
產(chǎn)品介紹
試劑盒組成：
名稱 | 規(guī)格 | 保存方法 |
JC-1 （200×） | 5× 100ul/管 | -20℃避光 |
JC-1染色緩沖液（5×） | 80mL | -20℃避光，也可4℃保存 |
CCCP（10 mM） | 20 uL | -20℃避光 |
超純水 | 90 mL | 4℃保存 |
檢測原理：
JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒是一種以JC-1 為熒光探針，快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于檢測線粒體的健康狀態(tài)，也是用來檢測細(xì)胞早期凋亡的常用方法。
是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。JC-1染料表現(xiàn)出電勢依賴性的積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來衡量。
線粒體膜電勢的破壞是細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的一個(gè)標(biāo)志性事件。細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加，使得線粒體蛋白包括細(xì)胞色\素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G（EndoG）、凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）等從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。細(xì)胞色\素C的釋放伴隨膜電位的*喪失，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞凋亡酶的級(jí)聯(lián)效應(yīng)。
JC-1染料的優(yōu)勢：
◆ 染料用途廣：可用來檢測各種細(xì)胞類型包括單核細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞，以及完整組織和純化的線粒體；
◆ 染料特異性更高：與其他的陽離子染料如DiOC6（3）和羅丹明123相比，對線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化，對線粒體去極化檢測的檢測*性更好；
◆ 紅綠色熒光強(qiáng)度比率只受線粒體膜電位的變化，不受線粒體大小，形狀，密度的差異干擾；
◆ 檢測靈敏度強(qiáng)，對細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別；
JC-1試劑盒操作步驟（詳細(xì)步驟請見說明書）：
1. JC-1 染色工作液的配制
取適量JC-1（200×），按照每50μL JC-1（200×）加入8mL 超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mL JC-1染色緩沖液（5×），混勻后即為JC-1染色工作液。
2. 陽性對照的設(shè)置
CCCP（10mM）推薦按照1∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10μM，處理細(xì)胞20分鐘。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10μM CCCP處理20分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3. 線粒體膜電位檢測（懸浮細(xì)胞）
（1）取1.0～6.0×105 細(xì)胞，重懸于0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入0.5mL JC-1染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。
（3）孵育期間按照每1mL JC-1染色緩沖液（5×）加入4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4） 37℃孵育結(jié)束后，600g 4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1染色緩沖液（1×）洗滌2 次：加入1mL JC-1染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4℃離心3～4分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4℃離心3～4分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量JC-1染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
4. 線粒體膜電位檢測（貼壁細(xì)胞）
5. 線粒體膜電位檢測（純化的線粒體）
6. 熒光觀測和結(jié)果分析
注意：
CCCP陽性對照屬于線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒性。操作時(shí)需避免直接接觸皮膚；
為了個(gè)人的安全和健康，請戴手套，口罩還有實(shí)驗(yàn)服進(jìn)行操作；
其他相關(guān)產(chǎn)品：
1）JC-1 貨號(hào)：QC1018 規(guī)格：1mg
2）羅丹明123 貨號(hào)：QC1021 規(guī)格：5mg
訂購：
貨號(hào) | 名稱 | 產(chǎn)地 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) | *（元） |
46007ES01 | JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒 | YEASEN | 100T | 800 | 800 |
46006ES10 | JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒 | YEASEN | 10mg | 441 | 374.85 |
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