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更新時(shí)間:2024-10-22 14:16:40瀏覽次數(shù):1583次
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血管緊張素 I(AI)放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)
原理(Principles) 血漿腎素活性(PRA)的測(cè)定是以血管緊張素Ⅰ (AⅠ)產(chǎn)生的速率來(lái)表示的。血漿中加入 酶抑制劑來(lái)抑制轉(zhuǎn)化酶和血管緊張素酶的活性,AⅠ不再進(jìn)一步降解,使測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。PRA 的測(cè)定是取雙份血漿,一份血漿在 37℃溫育一小時(shí),使腎素作用于血管緊張素原產(chǎn)生 AⅠ作為 測(cè)定管,另一份血漿在 4℃放置作為對(duì)照管。應(yīng)用放射免疫分析法 AⅠ的濃度減去對(duì)照管 AⅠ 的濃度,被溫育時(shí)間除之,則為單位時(shí)間內(nèi) AⅠ產(chǎn)生的速率,稱為腎素活性。
本分析藥盒標(biāo)記 物為 125I-AⅠ,采用免疫分離劑分離,快速﹑方便﹑準(zhǔn)確。
用途(Intended Use) 腎素是由腎臟近球體細(xì)胞產(chǎn)生的分子量為 40000 的一種羧基蛋白水解酶。它作用于血管緊 張素原產(chǎn)生血管素Ⅰ(AⅠ10 肽)。AⅠ在轉(zhuǎn)化酶的作用下形成血管緊張素(AⅡ 8 肽)。腎素-血 管緊張素系統(tǒng)有多種生理功能。在調(diào)節(jié)人體血壓、水和電解質(zhì)平衡代謝過(guò)程中起著重要作用。 另外,它與一些腎臟疾病及與腎臟有關(guān)的一些疾病有密切關(guān)系。 血漿腎素活性(PRA)和 AⅡ濃度的測(cè)定已成為原發(fā)性和繼發(fā)性高血壓分型診斷、治療及 研究的重要指標(biāo)。對(duì)一些有關(guān)腎臟疾病的診斷、治療以及發(fā)病機(jī)理的探討有著重要的意義。
數(shù)據(jù)處理(Calculation) 按常規(guī)方法計(jì)算 NSB%、B0%、B/B0% 在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上,以標(biāo)準(zhǔn)品 AⅠ濃度為橫坐標(biāo),以 B/B0%為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根 據(jù)血漿樣品(B/B0%)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品測(cè)定管和對(duì)照管相應(yīng)的 AⅠ濃度值。 PRA ng/mL/hr = 測(cè)定管 AⅠ濃度 – 對(duì)照管 AⅠ濃度 (當(dāng)血漿 AⅠ濃度超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍時(shí),應(yīng)將 37℃處理的血漿用溫育液適當(dāng)稀釋后復(fù)測(cè))
正常參考值(Normal Serum values) 各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件及接觸人群的不同,建立自己的正常值范圍。 下列數(shù)據(jù)僅供參考: 坐姿: 1.68 ± 1.12 ng/mL
注意事項(xiàng)(Attention):血樣的采集和保存 1) 待樣本脈搏穩(wěn)定后,坐姿采集肘靜脈血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷卻的含 20 μL EDTA 的 試管中,搖勻,放冰水浴中冷卻后,在 1000 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘(好 4℃離心),分離血漿, 取血漿 1 mL 放入另一支已預(yù)冷的含有 10 μL 酶抑制劑 1 和 20 μL 酶抑制劑 2 的試管中搖勻, 立即測(cè)定或置–20℃冰箱保存,可用兩周。 2) 激發(fā)試驗(yàn),樣本在基礎(chǔ)狀態(tài)采血后,給肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 體重)??倓┝坎怀^(guò) 50 mg,保持立位不飲水,兩小時(shí)后坐姿采血。
注意:注射速尿后兩小時(shí)內(nèi)隨尿排出的水電解質(zhì)較多,如樣本血鉀過(guò)低,試血前應(yīng)適當(dāng)給 予補(bǔ)充,試驗(yàn)過(guò)程中樣本可能出現(xiàn)口渴、無(wú)力、出汗等,一般不重,如過(guò)重應(yīng)酌情終止試 驗(yàn),讓樣本平臥,并給予糖鹽茶水。 3) β-阻斷劑、血管擴(kuò)張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般在停藥兩周 后測(cè) PRA,得血平等代謝慢的藥物應(yīng)停藥三周后測(cè)定,不適停藥的樣本應(yīng)改服胍乙啶等影 響 PRA 較小的降壓藥。 4) 鈉攝入量影響機(jī)體 PRA 水平,樣本測(cè)定 PRA 三天前應(yīng)適當(dāng)減少鈉鹽攝入量,樣本應(yīng)測(cè)定 取血前 24 小時(shí)尿鈉的含量,以供分析 PRA 結(jié)果時(shí)參考。
因失血引起循環(huán)血量減少或腎疾病導(dǎo)致腎血流量減少等,可促進(jìn)腎小球旁器的球旁細(xì)胞分泌腎素(一種酸性蛋白酶),進(jìn)入血液后,使血中由肝生成的血管緊張素原(屬α球蛋白)水解為血管緊張素Ⅰ(10肽),它隨血液流經(jīng)肺循環(huán)時(shí),受肺所含的轉(zhuǎn)化酶作用,被水解為8肽的血管緊張素Ⅱ,部分血管緊張素Ⅱ受血漿和組織液中血管緊張素酶A的作用,被水解為7肽的血管緊張素Ⅲ。
血管緊張素 I(AI)放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)
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