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Anti PEG 抗體(聚乙二醇抗體)常見問題解答

閱讀:58      發(fā)布時(shí)間:2025-6-10
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Anti PEG 抗體(聚乙二醇抗體)常見問題解答

PEG 抗體

公司簡(jiǎn)介:

Anti PEG由中國(guó)臺(tái)灣中央研究院生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所創(chuàng)立。因此,公司的抗體有時(shí)被稱為"中研院"抗聚乙二醇抗體。中央研究院成立于1928年,至今仍是中國(guó)臺(tái)灣頂尖的研究機(jī)構(gòu)之一。

1999年,Anti PEG道了具有聚乙二醇特異性識(shí)別的單克隆抗體E11AGP3(《生物共軛化學(xué)》10:520-528,1999)。其中AGP3抗體被成功應(yīng)用于聚乙二醇化干擾素α-2a(商品名派羅欣®)的加速開發(fā)(《生物共軛化學(xué)》12:195-202,2001;《專家意見-藥物遞送》6:1-16,2009)。

迄今公司已開發(fā)出系列抗PEG單克隆抗體,被全球280余所大學(xué)及國(guó)際制藥/生物技術(shù)公司用于聚乙二醇化藥物的分析與開發(fā)。

產(chǎn)品包括:

• 聚乙二醇化化合物與納米顆粒的定量檢測(cè)

• 靶向遞送PEG化納米載體的雙特異性抗體開發(fā)

• 人源抗PEG抗體制備

• 人體內(nèi)抗PEG抗體的檢測(cè)分析

產(chǎn)品描述:

聚乙二醇(PEG)是一種水溶性、無毒且生物相容性良好的聚合物。將PEG鏈與蛋白質(zhì)結(jié)合可降低其免疫原性、減少蛋白酶水解并延長(zhǎng)血清半衰期。PEG修飾技術(shù)還廣泛應(yīng)用于小分子藥物和脂質(zhì)體的靶向遞送系統(tǒng),通過對(duì)超順磁性氧化鐵顆粒和量子點(diǎn)的PEG化修飾,可顯著改善其生物相容性并降低非特異性攝取。

為實(shí)現(xiàn)PEG化化合物的高靈敏度檢測(cè),Anti PEG研發(fā)出PEG特異性單克隆抗體AGP3。迄今已開發(fā)出系列抗PEG IgG/IgM單克隆抗體,適用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、流式細(xì)胞術(shù)(FACS)、免疫組化(IHC)及細(xì)胞分選等檢測(cè)平臺(tái)。

產(chǎn)品系列

應(yīng)用

PEG IgG抗體

用于PEG化合物檢測(cè)

PEG IgM抗體

用于PEG化合物的高效捕獲

人源化PEG抗體標(biāo)準(zhǔn)品

作為抗藥抗體(ADA)檢測(cè)的IgGIgEIgM標(biāo)準(zhǔn)品

生物素標(biāo)記PEG抗體

PEG化合物的檢測(cè)與捕獲。

PEG抗體檢測(cè)組合套裝

用于快速篩選適合的抗體

產(chǎn)品訂購(gòu):

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號(hào)

規(guī)格

E11

E11-PABG-A

500ug

3.3

3.3-PABG-A

500ug

6.3

6.3-PABG-A

500ug

15-2b

15-2b-PABG-A

500ug

2B5

2B5-PABG-A

500ug

r33G

r33G-PABG-A

500ug

AGP3

AGP3-PABM-A

500ug

AGP4

AGP4-PABM-A

500ug

rAGP6

rAGP6-PABM-A

500ug

3.3-biotin

3.3-PABG-B

200ug

6.3-biotin

6.3-PABG-B

200ug

15-2b-biotin

15-2b-PABG-B

200ug

r33G-biotin

r33G-PABG-B

200ug

AGP3-biotin

AGP3-PABM-B

200ug

AGP4-biotin

AGP4-PABM-B

200ug

rAGP6-biotin

rAGP6-PABM-B

200ug

IgG Combo Kit

PEG-combo-IgG

1Kit

IgM Combo Kit

PEG-combo-IgM

1Kit

IgG Biotin Combo Kit

IgG-combo-biotin

1Kit

IgM Biotin Combo Kit

IgM-combo-biotin

1Kit

c3.3-IgG

cHu-3.3-IgG

50ug

cAGP4-IgM

cHu-AGP4-IgM

50ug

Hu-6.3 IgG

Hu-6.3-IgG

50ug

Hu-6.3 IgE

Hu-6.3-IgE

50ug

c3.3-IgG2

cHu-3.3-IgG2

50ug

c3.3-IgG3

cHu-3.3-IgG3

50ug

c3.3-IgG4

cHu-3.3-IgG4

50ug

cHu-3.3-IgG subclass
  (cHu IgG 1,2,3,4)

cHu-3.3-IgG subclass
  (cHu IgG 1,2,3,4)

1Kit

cHu-IgG/M subclass
  (cHu IgG 1,2,3,4&IgM)

cHu-IgG/M subclass
  (cHu IgG 1,2,3,4&IgM)

1Kit

Anti PEG 抗體常見問題解答(FAO

1什么是抗PEG抗體?

Anti PEG公司抗PEG抗體(AGP3AGP4、E113.36.3) 是小鼠單克隆抗體,可特異性結(jié)合聚乙二醇(PEG)聚合物中的重復(fù)單元。這些抗體能夠識(shí)別任何末端結(jié)構(gòu)或連接方式的PEG(包括甲氧基PEG),適用于PEG化分子(如PEG化蛋白、顆粒及脂質(zhì)體)的檢測(cè)與分析。

此外,公司還提供一種靶向mPEG末端甲氧基的單克隆抗體(15-2b)。近期公司開發(fā)新開發(fā)了一種具有溫度選擇性的抗PEG單克隆抗體(2B5),其能夠可逆地結(jié)合PEG,且結(jié)合活性隨溫度變化而調(diào)節(jié)。

2.抗體的抗體亞型是什么?

AGP3與AGP4IgM型抗體,需使用抗IgM二抗進(jìn)行檢測(cè);其余抗體(包括E11、3.3、6.3、2B515-1b)均屬IgG1亞型。

3.抗體的動(dòng)物來源是什么?

抗體為小鼠來源,檢測(cè)時(shí)請(qǐng)使用對(duì)應(yīng)的抗小鼠二抗。

4.抗體中是否已加了防腐劑?

抗體中添加0.02%NaN3作為防腐劑。如需無防腐劑抗體,可接受特殊訂單定制(無需額外費(fèi)用)。所有抗體產(chǎn)品均經(jīng)過濾除菌處理。

5.抗體是否家里載體蛋白。

無。

6. 抗體產(chǎn)品的儲(chǔ)存緩沖液成分是什么?

抗體以PBS緩沖液(含0.14 M NaCl、2.7 mM KCl、1.5 mM KH2PO4、8.1 mM Na2HPO4)形式運(yùn)輸。對(duì)于生物素化抗體或非干冰運(yùn)輸?shù)目贵w,我們將添加50%甘油作為保護(hù)劑。

7.抗體應(yīng)該如何保存?

抗體保存指南:

1)50%甘油保存的抗體:可長(zhǎng)期保存于-20

2)干冰運(yùn)輸?shù)目贵w:建議保存于-80

使用時(shí),請(qǐng)分裝為工作用量后凍存于-80℃(或-20℃)。未污染微生物時(shí),4℃可穩(wěn)定保存數(shù)月??深~外添加50%甘油,于-20℃保存至少1

禁止以下操作:

1)儲(chǔ)存前稀釋抗體。 2)反復(fù)凍融抗體。

8.抗體可以保存多久?

未稀釋的抗體在-80℃條件下可穩(wěn)定保存至少3年;若添加50%甘油并于-20℃保存,則有效期至少為1年。

9. 這些抗體結(jié)合部位在哪里?

多數(shù)抗PEG抗體可結(jié)合聚乙二醇(PEG)聚合物中的重復(fù)單元,其最小結(jié)合域因抗體而異。例如:

3.3抗體:無法結(jié)合分子量<750 DaPEG分子

6.3抗體:可識(shí)別更小的抗原表位

AGP4抗體:結(jié)合表位最?。▋H需4個(gè)環(huán)氧乙烷單元構(gòu)成的PEG4

抗體按識(shí)別表位大小排序(從大到?。?/span>

3.3 > AGP3 > E11 > 6.3 > AGP4

特別說明:

15-2b抗體不結(jié)合PEG主鏈,僅特異性識(shí)別mPEG末端的甲氧基。

10. 這些抗體能否結(jié)合游離(未偶聯(lián))的PEG分子?

1)可檢測(cè)情況:

只要PEG分子處于"固定化"狀態(tài),這些抗體即可與之結(jié)合。例如:

氨基末端PEG:可吸附于ELISA板,抗體對(duì)其顯示強(qiáng)結(jié)合力

其他固定化形式:

免疫組化切片中的PEG

硝酸纖維素膜上的PEG

最佳結(jié)合對(duì)象:與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)體、細(xì)胞及納米顆粒物理結(jié)合的PEG

2)不可檢測(cè)情況:

溶液中的游離PEG鏈僅被抗體低親和力結(jié)合,因此:ELISA檢測(cè)游離PEG靈敏度較低,未偶聯(lián)PEG不會(huì)干擾檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

解決方案:

如需檢測(cè)游離PEG濃度,建議采用我們新開發(fā)的細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)。

11.該抗體能否識(shí)別支鏈PEG及長(zhǎng)鏈PEG?

1)支鏈PEGbranched chain PEG):

可結(jié)合,但親和力取決于分支點(diǎn)結(jié)構(gòu)(需實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證)

2)長(zhǎng)鏈PEGlong PEG):

分子量>1,000 Da:強(qiáng)結(jié)合(依賴重復(fù)單元表位)

分子量<750 Da:參見抗體特異性列表(如3.3抗體不結(jié)合)

12. 末端基團(tuán)或連接臂是否會(huì)影響抗體的結(jié)合?

本公司的抗PEG抗體(AGP3、AGP4E11、3.3、2B56.3)均靶向PEG骨架結(jié)構(gòu),其結(jié)合活性不受偶聯(lián)技術(shù)或末端基團(tuán)影響;而15-2b抗體則特異性識(shí)別部分PEG分子(mPEG)末端的甲氧基。

13.這些抗體能否用于血清樣本中PEG化化合物的檢測(cè)?

可以!經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,血清基質(zhì)不會(huì)顯著影響本公司抗PEG抗體與PEG化化合物的結(jié)合效能。

14. Tween-20是否會(huì)干擾抗體的結(jié)合活性?

1)6.3抗體:

嚴(yán)禁使用Tween-20(會(huì)顯著影響結(jié)合活性)

2)其他抗體(AGP3/E11/3.3/15-2b):

可安全用于ELISA檢測(cè)(推薦濃度≤0.05%

科學(xué)依據(jù):所識(shí)別的表位大于Tween-20PEG連接區(qū)

替代方案:

可使用CHAPS替代Tween-20

3)特殊案例(AGP4):

雖識(shí)別小表位,但因IgM抗體的高親合力,Tween-20無顯著影響

15. ELISA檢測(cè)應(yīng)如何選擇抗體?

捕獲抗體:推薦使用 AGP4,包被濃度:0.25 μg/孔(96孔板)

檢測(cè)抗體(生物素標(biāo)記):可選:AGP3-biotin、3.3-biotin AGP4-biotin,選擇:3.3-biotin(通常表現(xiàn)較好)

信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng):鏈霉親和素-HRP(推薦使用Jackson LaboratoriesSA-HRP

16. PEG ELISA可檢測(cè)哪些類型的分子?

經(jīng)我們及同行驗(yàn)證的可檢測(cè)分子包括(但不限于):多種PEG修飾蛋白、PEG修飾脂質(zhì)體、PEG修飾納米點(diǎn)及PEG化納米顆粒。

17.抗體的檢測(cè)靈敏度是多少?

檢測(cè)限與待測(cè)物類型高度相關(guān):

PEG化量子點(diǎn):~1 pM(夾心法檢測(cè))

• 脂質(zhì)體藥物(如Lipodox®):1 ng/mL

PEG化蛋白(如Pegasys®):1 ng/mL

18.有沒有標(biāo)準(zhǔn)的PEG抗體ELISA檢測(cè)流程?

是的,具體流程咨詢Anti –PEG中國(guó)區(qū)授權(quán)總代理北京博蕾德生物科技有限公司。

19. 能否使用AGP3同時(shí)作為包被抗體和檢測(cè)抗體?

不可以。

原因如下:

背景干擾機(jī)制

當(dāng)加入二抗(抗IgM或抗Ig偶聯(lián)物)時(shí),其會(huì)與包被在板上的AGP3結(jié)合,導(dǎo)致持續(xù)高背景信號(hào)

推薦方案
?
檢測(cè)體系

包被抗體AGP3 AGP4

·       檢測(cè)抗體AGP3-biotin/AGP4-biotin/3.3-biotin

·       信號(hào)系統(tǒng):鏈霉親和素-HRPSA-HRP

此組合適用于所有PEG化化合物的檢測(cè)

20.能否用低濃度抗體作為包被或檢測(cè)抗體?

是的,但當(dāng)AGP3用作捕獲抗體時(shí),檢測(cè)靈敏度會(huì)降低。然而,AGP4的量可以減少到0.25mg/孔,對(duì)測(cè)定靈敏度的影響很小。  

21. 可以預(yù)先混合生物素和鏈霉抗生物素蛋白檢測(cè)試劑嗎?

可以,強(qiáng)烈建議在將AGP3生物素或AGP4生物素加入ELISA板之前,將其與鏈霉抗生物素蛋白-HRP預(yù)混合。通常通過預(yù)混合來提高檢測(cè)靈敏度(見下文數(shù)據(jù))。檢測(cè)時(shí)間也縮短了。

22.有沒有其他客戶使用過這些抗體?

是的,全球已有逾100家制藥與生物技術(shù)公司采購(gòu)并使用本公司的抗PEG抗體。

23.如何訂購(gòu)Anti-PEG 公司抗體?

請(qǐng)通過Anti-PEG授權(quán)中國(guó)區(qū)總代理北京博蕾德生物科技有限公司訂購(gòu)。

更多產(chǎn)品咨詢,請(qǐng)垂詢Anti-PEG授權(quán)中國(guó)區(qū)總代理北京博蕾德生物科技有限公司



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