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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	T-25 Flask
貨號(hào)	CBP73368	應(yīng)用領(lǐng)域	生物產(chǎn)業(yè)

TPR-MET L1195F/BaF3 kinase細(xì)胞株 TPR-MET L1195F/BaF3 kinase細(xì)胞株 I. Background
激酶(RTKs)是跨膜蛋白，在信號(hào)通路的啟動(dòng)和調(diào)節(jié)中起重要作用。大多數(shù) RTK 在細(xì)胞外配體結(jié)合時(shí)被激活，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)磷酸化的傳遞，從而驅(qū)動(dòng)信號(hào)傳導(dǎo)。 MET 是一種受體激酶(RTK)，參與發(fā)育和傷口修復(fù)的信號(hào)通路。MET 的激活依賴(lài)于配體與細(xì)胞外受體的結(jié)合，從而促進(jìn)二聚化、細(xì)胞內(nèi)磷酸化和相關(guān)信號(hào)蛋白的募集。 c-MET 是肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)激酶受體，MET 與 HGF 結(jié)合后，發(fā)生自身磷酸化并激活下游 PI3K/AKT、RAS-MAPK、β-catenin 信號(hào)通路等多條信號(hào)通路，從而發(fā)揮其促細(xì) 胞增殖、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、侵襲血管及血管生成等效應(yīng)，在組織正常發(fā)育和腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。HGF/MET 通路異常與腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)并誘導(dǎo)耐藥性的產(chǎn)生，包括 MET 基因重排、基因突變、基因擴(kuò)增和過(guò)表達(dá)。 TPR-MET 重排是由 1 號(hào)染色體上的 TPR(易位啟動(dòng)子區(qū))位點(diǎn)與染色體上的 MET 位點(diǎn) 衍生的序列的 5 '區(qū)域融合引起的。融合分子 TPR-MET 包含 cMET 原癌基因的激酶結(jié)構(gòu)域，TPR 序列由組成啟動(dòng)子和開(kāi)放閱讀框組成。它不需要依賴(lài) HGF 的刺激下其激酶活性持續(xù)很高，并且本身的呈現(xiàn)被磷酸化狀態(tài)，從而引起 MET 信號(hào)通路的異常激活和細(xì)胞增殖、運(yùn)動(dòng)及血管和其他腫瘤微環(huán)境狀態(tài)的改變，最終成為腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的驅(qū)動(dòng) 因素。致癌突變的激活也可以發(fā)生在 MET 的其他結(jié)構(gòu)域，包括激酶結(jié)構(gòu)域(TKD)，導(dǎo) 致與配體無(wú)關(guān)的受體磷酸化和信號(hào)傳導(dǎo)。在約 13-20%的Ⅰ型乳頭狀腎細(xì)胞癌(pRCC)中發(fā) 現(xiàn) MET TKD 的激活遺傳性或散發(fā)性點(diǎn)突變，并通過(guò)影響激活環(huán)的構(gòu)象、促進(jìn)激酶結(jié)構(gòu)域磷酸化和促進(jìn)下游致癌信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致 MET 受體的組成性激活。在 pRCC 中發(fā)現(xiàn)的 MET 激活突變的種類(lèi)包括:V1092I (V1110)、H1094Y/R/L (H1112)、H1124D (H1142)、 L1195F/V (L1213)、F1200I (F1218)、V1188L (V1206)、Y1220I (Y1238)、D1228H/N (D1246)、Y1230C/D/H (Y1248)、M1131T (M1149)和 M1250T (M1268)。這些激活的 MET 突變也可以引起對(duì) MET TKIs 的抗性，從而引起對(duì) MET TKI 的獲得性耐藥。

II. Description
BaF3（小鼠原 B 細(xì)胞）的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因，能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依賴(lài)的驅(qū)動(dòng)基因，用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。 Figure 1. TPR-MET[L1195F] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

III. Introduction
Cell Line Name：	TPR-MET [L1195F]/BaF3
Host Cell:	Ba/F3
Stability:	16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium:	90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium:	RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml puromycin
Mycoplasma Status:	Negative

IV. Representative Data
1.WB of TPR-MET [L1195F]/BaF3 Figure 2. WB of TPR-MET [L1195F]/BaF3
2.Sanger of TPR-MET [L1195F]/BaF3 Figure 3.TTPR-MET [L1195F]/BaF3 Fusion Figure 4.TPR-MET [L1195F]/BaF3 L1195F
3. Anti-proliferation assay Figure 5. CTG Proliferation Assay of TPR-Met [L1195F] BaF3 (C1).