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角分辨散射儀的操作經(jīng)驗分享

閱讀:1136      發(fā)布時間:2022-6-22
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  角分辨散射儀是以特定頻率入射光照射這些粒子,它們不吸收入射光能量,而僅作為二次波源向各個方向發(fā)射與入射光頻率相同的球面散射光,這種沒有頻率位移(即無能量變化)的散射稱為彈性光散射(elastic light scattering),也常稱為經(jīng)典光散射(classical light scattering)、靜態(tài)光散射(static light scattering)在靜態(tài)光散射情況下,通常用來表征一個體系的散射能力和角度依賴性。
  角分辨散射儀譜操作規(guī)程:
  1、開機前準備:水:蒸餾水,有機溶劑:色譜純。緩沖鹽溶液:配置完成后過2層0.22um濾膜。流動相需準備充足。
  2、系統(tǒng)平衡:根據(jù)需要選擇凝膠柱以及需要連接的檢測器。開啟脫氣機,泵、柱溫箱、檢測器以及電腦開關。點擊quick start pump進行流速設置,點擊ASTRA進行實驗方法設置。提前24小時將流速調至試驗所需流速進行系統(tǒng)平衡,其中注意流動相過渡問題,待檢測器沖平后可進行進樣分析。
  3、進樣:建議標準樣品歸一化處理,用于激光18角度校正,建議進樣前進行該處理。多糖需用3-5mg/mL分子量為五萬以下的右旋糖酐進行激光,蛋白質以2-4mg/mL的BSA作為歸一化樣品。所以樣品離心后取上層清液過0.45um濾膜。手動進樣器扳至load狀態(tài)進行進樣,一般需進3-5倍進樣環(huán)體積以清洗進樣環(huán),點擊軟件中運行后將進樣器扳至Inject狀態(tài)進行數(shù)據(jù)采集。
  4、數(shù)據(jù)分析:數(shù)據(jù)采集后需進行定基線、峰等數(shù)據(jù)處理,依據(jù)實驗需要提前實驗數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)可以通過圖表中郵件中edit進行數(shù)據(jù)導出。
  5、關機:色譜柱和系統(tǒng)清洗-流動相沖洗2-3個小時,根據(jù)流動相性質選擇合適溶劑過渡,如緩沖鹽流動相沖洗后需用萬分之二疊代鈉清洗一晚上后換20%甲醇沖洗足夠時間后,進行色譜柱保存,關閉儀器電源。實驗完成后做好登記工作。


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