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厭氧培養(yǎng)箱使用方法

時間:2016/12/9閱讀:3675
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 厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境下進行細菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)zui難生長的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時接觸氧氣而死亡的危險 。廣泛應用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農(nóng)業(yè)科學、藥物學的研究和生產(chǎn),已經(jīng)成為上述領(lǐng)域?qū)嶒炇页S玫膬x器。我們在使用如何正確規(guī)范的操作厭氧培養(yǎng)箱呢,下面就做簡單介紹。
一、操作形成厭氧環(huán)境

1、調(diào)整混氮氣瓶、合氣瓶輸出壓力:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。
2、接通電源開關(guān),開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度,操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
3、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。
4、操作室內(nèi)放入經(jīng)過干燥過1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入?yún)捬踔甘緞ǚ忾])。
5、 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。
6、操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一頭插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),至全部放出。
7、操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,并注意隨時開閉排氣閥。

8、操作室第三次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為:N2 90%;H2 5%;CO2 5%)。
(1)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時開閉排氣閥。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥)。
(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
9、操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開厭氧指示條觀察其變色,變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。
10、開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間自定。

二、菌種的置入和培養(yǎng)

1、檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2、打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。
3、 取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。
4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5、取樣室內(nèi)外門開啟,關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)檢驗及幫助操作。
6、厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
(1)每天在操作室內(nèi)觀察厭氧指示條,正常情況下可繼續(xù)使用。如不正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3)連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7、接種棒滅菌器的應用:
(1)隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

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