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上海信裕生物科技有限公司
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ELISA 標準曲線制作方法

時間:2017-4-11閱讀:1419
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ELISA 標準曲線制作方法

一般而言,我們擬合ELISA標準曲線選用比較經(jīng)典的Curve Expert 1.3或者Curve Expert 1.4軟件。現(xiàn)在我們以Curve Expert 1.4為例,對ELISA標準曲線繪制方法進行詳述。
 
1. 點擊Curve Expert 1.4,打開應用程序,截圖界面如下:
 

 
 
2.在X軸輸入標準品的OD值,Y軸輸入相應的標準品的濃度,截圖界面如下:  
 

 
3. 單擊上圖界面中的 圖標,出現(xiàn)如下界面


 

4. 單擊上圖界面中的ALL OFF 按鈕,出現(xiàn)如下界面
 

 
 
5. 我們選擇Sigmoidal Models這種曲線擬合模型進行ELISA標準曲線的擬合,點擊OK,出現(xiàn)下圖界面:
 

 
注意:上圖界面中的r值越高,即當r值越接近1時,所擬合的曲線就越好,所得到的數(shù)值可靠性也就也高。


6. 在上圖空白界面,按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現(xiàn)如下界面
 
 

 
在上圖中輸入相應的OD值(X值)后,點擊Calculate即可計算出待測物的濃度(Y值),待測物稀釋了多少倍就在所測值的基礎上乘以稀釋倍數(shù)即zui終濃度。

7. 點擊所繪制的曲線圖中左上方 按鈕,可以得到如下ELISA曲線擬合方程
 

 
 
8. 點擊下圖中 Copy 即可得到上圖界面中的曲線方程數(shù)據(jù)
 

 
 
Logistic Model: y=a/(1+b*exp(-cx))
Coefficient Data:
a =       -1.19763443774E+004
b =       -8.45403498052E+001
c =       1.30213993104E+000
 
 

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