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共聚焦顯微鏡測量過程和原理

閱讀:2665        發(fā)布時(shí)間:2019-11-6

LED光源 (1) 發(fā)出的光束經(jīng)過一個高速旋轉(zhuǎn)多孔轉(zhuǎn)盤MPD(2)和物鏡后,聚焦到樣品表面 (3);之后光束經(jīng)樣品表面反射回測量系統(tǒng);再次通過MPD上的針孔時(shí),反射光將只保留聚焦的光點(diǎn)。后,光束經(jīng)平面鏡 (4) 反射后在CCD相機(jī) (5)上成像。多孔盤通過高速旋轉(zhuǎn),率的完成對樣品表面的全部掃描,極大提高了測量速度,并且從原理上*避免了臨近測量點(diǎn)的散射光對CCD像素的干擾。

物鏡通過一個高精度Z軸驅(qū)動裝置(壓電模塊)垂直運(yùn)動,從而使系統(tǒng)得以在不同高度采集一個照片序列。

每幅共聚焦圖像對應(yīng)樣品的一個水平截面,每次測量可采集多達(dá)1000幅共聚焦圖像。每個像素的亮度在不同高度上變化,大亮度的位置即為聚焦位置。整體來看,每個像素的亮度在高度上呈現(xiàn)為一個共聚焦曲線。這樣,單個像素點(diǎn)的高度就可以通過共聚焦曲線來計(jì)算得出。

測量后每個像素會被定位于一個3D表面重構(gòu)圖之中。結(jié)合亮度信息,一個高分辨率、大景深的顯微圖像同時(shí)生成。高度,長度,距離,直徑,面積,體積,粗糙度,平面度等眾多參數(shù)同時(shí)被計(jì)算出來。

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