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在植物ELISA試劑盒實驗中，選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的

閱讀：1160 發(fā)布時間：2022-11-15

　　植物ELISA試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析檢測法可快速、準(zhǔn)確地測定植物。多種簡便、可靠、精準(zhǔn)、穩(wěn)定性好的生化檢測試劑盒和ELISA檢測試劑盒。

　　在植物ELISA試劑盒實驗中，選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的，其中包括：

　　（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

　　（2）包被抗體的選擇：將抗體吸附在固相載體表面時，要求純度要好。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響，一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。

　?。?）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

（4）酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

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