分析影響ELISA非特異性顯色

目前因?yàn)榧夹g(shù)前提的限制，包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到100%，所以有些非特異性顯色不可避免，只能盡可能進(jìn)步純度，進(jìn)步特異性。它具有良好的吸附機(jī)能，孔底透明度高，空缺值低，各板之間、統(tǒng)一板各孔之間機(jī)能相近。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、出產(chǎn)及使用中經(jīng)常會遇到非特異性題目，本文就在實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特異性顯色作一分析。本文就這一原因作一扼要分析，以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度，從而進(jìn)步檢測的特異性，并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 聚苯乙烯ELISA板因?yàn)樵系牟煌椭谱鞴に嚨牟顒e，各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞溶解破裂，開釋出血紅素形成，而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。因此，在選擇ELISA試劑盒同時(shí)要對其使用的微孔板型號進(jìn)行認(rèn)證，評估。試劑盒特異性因素固相載體的選擇，ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見。外源性干擾物，經(jīng)常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血，被細(xì)菌污染，標(biāo)本凝集不全等。如在冰箱中保留過久，其中的IgG可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。但因?yàn)槭芊椒▽W(xué)及技術(shù)前提的限制，在酶聯(lián)吸附測定中有時(shí)不可避免的會泛起一定的非特異性，但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，從而進(jìn)步檢測的特異性，并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）自1971年自問世以來，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操縱簡便、安全，而廣泛應(yīng)用于臨床診斷，開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷。