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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2018-11-2 閱讀(2432)
(1)復(fù)制方法 采用經(jīng)額蛛網(wǎng)膜下腔插管直達大腦動脈(Willis)環(huán)處2次注血制成大白鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后DCV模型。
健康大鼠，體重為200～250g，雌雄不拘，經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉大鼠，剃除頭頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。切開頭頂部中線皮膚，鈍性分離肌肉及骨膜。距前囟前5mm、中線旁3mm處用電動牙科鉆鉆孔達腦膜，此骨孔恰好在前顱窩底與額極交接處。適當(dāng)擴大骨孔，在手術(shù)顯微鏡下小心挑破腦膜，當(dāng)清亮腦脊液流出時將PC-10塑料管指向雙耳連線中點、緊貼前顱底蛛網(wǎng)膜下腔送入，深度8～10mm(經(jīng)解剖測量此長度導(dǎo)管頂端恰位于大腦動脈(Willis)環(huán)前部)，連接注射器回抽有清亮腦脊液而無血液，提示穿刺成功。用骨蠟封閉骨創(chuàng)口，縫合肌肉并固定穿刺管。再于距前囟后3mm、中線旁3mm處左或右鉆一骨孔，挑破腦膜，插入測量電極于皮層內(nèi)(深度1mm)，用于局部腦血流(rCBF)的測定。
斷尾取自體血150μl經(jīng)PC-10管緩慢注入蛛網(wǎng)膜下腔后，灼封塑料管并縫合皮膚。24h后同上述麻醉固定，剪開塑封管，再次注入自體血100μl。于末次注血6h后用生理
鹽水灌冼，4％多聚甲醛灌注固定，先快后慢，斷頭取腦，行大體及形態(tài)學(xué)觀察。也可于末次注血6h后先進行腦血管造影以觀察全腦血管痙攣情況。方法：麻醉后切開頸部皮膚，分離頸總動脈，經(jīng)頸內(nèi)動脈插管至顱底，注入60％泛影葡胺1ml進行全腦造影。
(2)模型特點 rCBF測定顯示局部血流量明顯降低。大體觀察可見大量血液積聚于大腦動脈(Willis)環(huán)處，大腦前中動脈、基底動脈均被陳舊性血凝塊包裹，前顱窩底、蝶鞍及后顱窩處均有陳舊性血凝塊殘留。微血管形態(tài)學(xué)觀察可見微血管管徑縮小。圖像分析可見血管總面積、血管數(shù)及平均血管面積均明顯降低。
(3)比較醫(yī)學(xué) 目前對DCV產(chǎn)生的機制有諸多觀點，但多傾向于是一種功能改變而非結(jié)構(gòu)改變。由于進行灌注固定時灌注壓、pH值、理化因素等對大動脈的影響，觀察大動脈的病變并不能真實地反映DCV的改變。以微血管的改變來反映DCV比大腦動脈環(huán)周圍大血管的改變來反映更可靠。經(jīng)小腦幕上蛛網(wǎng)膜下腔直達大腦動脈環(huán)周圍的直接注血法更加真實地模擬了SAH的病理過程，且操作簡單，出血易于控制，是一個較為可靠的SAH模型。由于該模型可重復(fù)性好，適用于DCV的研究。
