當離子對試劑遇上質(zhì)譜檢測器 

離子對試劑是極性藥物分析方法開發(fā)常用的添加劑，可以增強極性化合物的保留，改善藥物與雜質(zhì)的分離，有助于控制更多的雜質(zhì)。由于離子對試劑不揮發(fā)，不能直接與質(zhì)譜檢測器聯(lián)用。小編曾親歷一臺被離子對試劑污染的質(zhì)譜檢測器，辛烷磺酸鈉粘附在離子源與透鏡系統(tǒng)上，質(zhì)譜響應強且信號經(jīng)久不衰。無論進樣與否，在質(zhì)譜儀上只能觀察到離子對試劑的響應，持續(xù)抑制目標化合物的電離。如果您以為只是一個質(zhì)量數(shù)的干擾，就太小瞧它們了。離子對試劑可以生成簇離子，通俗的講就是1個，2個…n個辛烷磺酸鈉簇在一起，在質(zhì)譜上呈現(xiàn)加合離子峰，從而造成正負兩個模式寬質(zhì)量范圍的廣泛污染。有了一次污染終生難忘的慘痛教訓，當離子對試劑遇上質(zhì)譜鑒定需求，您是否會選擇繞著走？且慢，島津公司推出在線去除離子對試劑的方法，且聽小編向您娓娓道來。

首先，您需要選擇一臺通用型液相檢測器。

通用型檢測器：幫您"看見"離子對試劑

按照待分析化合物的性質(zhì)可以將離子對試劑分為陽離子型和陰離子型兩種。常見陽離子型離子對試劑有戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉和辛烷磺酸鈉等。常見陰離子型離子對試劑有四丁基硫酸氫銨、氫氧化四丁基銨、氯化四丁基銨和溴化四丁基銨等。由于一維流動相中離子對試劑的類型和濃度千差萬別，二維方法需要個性化開發(fā)。由于常見離子對試劑均無紫外吸收，島津通用型檢測器：示差折光檢測器與蒸發(fā)光散射檢測器將祝您一臂之力，幫您“看見"離子對試劑，有效應對流動相含離子對試劑的方法開發(fā)需求。

常規(guī)二維液相在線除鹽系統(tǒng)僅能去除無機鹽，無法去除離子對試劑。不同于無機鹽，離子對試劑比目標物具有更強的疏水性，其在反相色譜柱上的出峰時間晚于目標物，因此無法采用無機鹽類似的方法在線去除。在化學藥物雜質(zhì)鑒定時，雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)通常是未知的。未知意味著一切皆有可能。堿性化合物的雜質(zhì)可能是中性或酸性；最佳吸收波長363 nm的藥物其雜質(zhì)最佳波長可能在220 nm；極性藥物的雜質(zhì)也可能是非極性的。因此，未知雜質(zhì)的鑒定要求二維運行寬梯度并配備二極管陣列檢測器獲取全波段的紫外吸收信息。

那么，如何有效避免離子對試劑在高比例有機相下洗脫帶來的儀器污染呢？

您需要一支島津SGLC ReDual系列混合模式色譜柱。

ReDual:一款可以同時分離無機、有機、陰、陽離子的神柱

ReDual系列色譜柱，是島津SGLC推出的離子交換反相混合鍵合相色譜柱，共分為三款：

ReDual™ SCX-C18 強陽離子交換+反相

ReDual™ CX-C18  陽離子交換+反相

ReDual™ AX-C18  陰離子交換+反相

ReDual™ SCX-C18 強陽離子交換+反相混合鍵合相色譜柱填料示意

在線去除陰離子對試劑方案

下圖是采用Shim-pack GIST C18-AQ與ReDual AX-C18 (4.6 mm I. D. × 150 mm L., 5 µm，貨號426-45415)分析磷酸二氫鈉、四丁基硫酸氫銨和某陰離子型目標物混合樣品模擬二維進樣的納克級激光計數(shù)檢測器色譜圖。在常規(guī)Shim-pack GIST C18-AQ色譜柱上，四丁基硫酸氫銨出峰時間在目標物之后，不利于雜質(zhì)分析方法的開發(fā)。ReDual AX-C18色譜柱表面鍵合叔胺基團，在pH 2-7范圍內(nèi)色譜柱表面帶陽離子，除疏水作用外，其對陰離子具有離子交換作用。在AX-C18色譜柱上，四丁基硫酸氫銨出峰時間在目標物之前，可以通過閥切換導入廢液實現(xiàn)在線去除。

在線去除陽離子對試劑方案

下圖是采用Shim-pack GIST C18-AQ與ReDual SCX-C18 (4.6 mm I. D. × 150 mm L., 5 µm，貨號426-35415)分析磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、戊/己/庚/辛烷磺酸鈉和某陽離子型目標物模擬二維進樣的納克級激光計數(shù)檢測器色譜圖。在常規(guī)AQ-C18色譜柱上，常見陽離子型離子對試劑出峰時間在目標物之后，不利于雜質(zhì)分析方法的開發(fā)。ReDual SCX-C18色譜柱表面鍵合磺酸基團，在pH 2-7范圍內(nèi)色譜柱表面帶陰離子，除疏水作用外，其對陽離子具有離子交換作用。在SCX-C18色譜柱上，常見陽離子型離子對試劑出峰時間在目標物之前，可以通過閥切換導入廢液實現(xiàn)在線去除。

應用案例：

某堿性藥物注射液雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定

某堿性藥物有關(guān)物質(zhì)分析方法使用C18反相色譜柱，流動相添加磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)pH至2.2）與己烷磺酸鈉；二維使用ReDual SCX-C18色譜柱，在線去除己烷磺酸鈉和磷酸二氫鉀。實驗結(jié)果表明，質(zhì)譜圖中未見離子對試劑干擾，成功實現(xiàn)目標雜質(zhì)的質(zhì)譜鑒定（結(jié)構(gòu)略）。

雜質(zhì)2的一級質(zhì)譜圖

島津在線去除離子對試劑方案具有三大技術(shù)優(yōu)勢：

1、采用常規(guī)中心切割二維液相硬件系統(tǒng)，無需改造儀器

2、目標物在高比例有機相條件出峰，提高MS靈敏度

3、脫鹽條件溫和，可操作性強

總結(jié)

島津中國創(chuàng)新中心搭載的特色中心切割二維色譜雜質(zhì)鑒定系統(tǒng)，二維使用島津SGLC公司ReDual™ AX-C18 和ReDual™ SCX-C18混合填料色譜柱，成功實現(xiàn)一維流動相中常見離子對試劑和無機鹽的在線去除，可在極性藥物雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定領(lǐng)域廣泛推廣。