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導(dǎo)讀

為了保障人們的食品安全，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布了《GB 31658.20-2022 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中酰胺醇類(lèi)藥物及其代謝物殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，該標(biāo)準(zhǔn)自2023年2月1日開(kāi)始已正式實(shí)施。然而小編在走訪(fǎng)客戶(hù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)不少實(shí)驗(yàn)室在分析該類(lèi)化合物的時(shí)候，不約而同出現(xiàn)了以下問(wèn)題：

酰胺醇類(lèi)藥物

酰胺醇類(lèi)藥物又稱(chēng)氯霉素類(lèi)抗生素，屬于廣譜抗生素，常見(jiàn)的該類(lèi)藥物主要包括氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考等。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號(hào)已明確將氯霉素列入《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》。甲砜霉素為氯霉素類(lèi)衍生物，而氟苯尼考是新一代氯霉素類(lèi)抗生素，氟苯尼考胺是其主要代謝產(chǎn)物。根據(jù)《GB 31658.20-2022》，除氯霉素的內(nèi)標(biāo)選擇是氯霉素-D5外，其它3種均是采用的都是其-D3的內(nèi)標(biāo)物。

表1. 常見(jiàn)酰胺醇類(lèi)藥物

酰胺醇類(lèi)分析難點(diǎn)

從以上化學(xué)式可以看到，該類(lèi)物質(zhì)都含有一個(gè)或兩個(gè)氯元素，而氯元素非常顯著的特點(diǎn)則是有Cl35和Cl37的同位素。

我們以氟苯尼考為例，上圖和下圖分別為氟苯尼考標(biāo)樣和氟苯尼考D3內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜圖，可以看到，氟苯尼考除了在m/z 356和m/z 358處有較高響應(yīng)外，在m/z 359處也有一定響應(yīng)，而m/z 359正是氟苯尼考-D3的母離子。那么，氟苯尼考在m/z 359的響應(yīng)是否會(huì)對(duì)內(nèi)標(biāo)物氟苯尼考-D3的響應(yīng)造成干擾，從而導(dǎo)致了這一問(wèn)題的產(chǎn)生？

為此，我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)小實(shí)驗(yàn)。只進(jìn)標(biāo)樣溶液（不含內(nèi)標(biāo)），我們看到其在內(nèi)標(biāo)通道也是有響應(yīng)的，以下是10 ng/mL氟苯尼考的色譜圖，氟苯尼考在定量通道上的峰面積是3457270，而在內(nèi)標(biāo)通道上的峰面積達(dá)到296836，占比8.6%。這樣也就不難理解隨著目標(biāo)物濃度的不斷提高，內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)也會(huì)隨之增大了，這樣的情況下，內(nèi)標(biāo)法得到的線(xiàn)性曲線(xiàn)當(dāng)然不佳了。

島津解決方案

如何解決這些含氯化合物-D3同位素內(nèi)標(biāo)因目標(biāo)組分帶來(lái)的響應(yīng)干擾問(wèn)題？比較簡(jiǎn)單的方法是避開(kāi)受到干擾的離子而選擇其它離子作為母離子，如氟苯尼考-D3，選擇m/z 361作為母離子，因?yàn)榉?/span>苯尼考對(duì)m/z 361離子的貢獻(xiàn)更小。下表為化合物新選擇的離子對(duì)信息。

表2. 酰胺醇類(lèi)藥物內(nèi)標(biāo)推薦離子對(duì)信息

改變成新的離子對(duì)信息后，甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的線(xiàn)性改善非常明顯，這樣內(nèi)標(biāo)法的線(xiàn)性不佳問(wèn)題就妥妥的解決啦！

總結(jié)

看了本期的難點(diǎn)項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)分享，相信大家都有所了解，如果分析的化合物中含有氯或溴元素時(shí)，可要小心了，經(jīng)?？赡艹霈F(xiàn)因?yàn)閮?nèi)標(biāo)離子通道選擇的不合適，造成目標(biāo)物的同位素峰與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量數(shù)發(fā)生重疊的問(wèn)題，從而影響到線(xiàn)性乃至定量有偏差。因此在分析這類(lèi)化合物時(shí)，尤其是化學(xué)式中含有不止一個(gè)氯或溴元素的物質(zhì)時(shí)，建議大家可以盡量購(gòu)買(mǎi)含氘代、13C或15N個(gè)數(shù)比較多的同位素內(nèi)標(biāo)，另一方面，當(dāng)化合物在內(nèi)標(biāo)的通道有干擾時(shí)，我們也可以選擇[M-H+2]-作為內(nèi)標(biāo)的母離子而不是基峰[M-H]-。

島津應(yīng)用云后續(xù)還將發(fā)布獸藥分析大講堂系列，根據(jù)獸藥檢測(cè)技術(shù)的難點(diǎn)項(xiàng)目，陸續(xù)發(fā)布檢測(cè)關(guān)鍵點(diǎn)小貼士及解決方案，幫助大家共克食品安全難關(guān)。

撰稿人：駱丹

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