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核酸保存純化:Streck 采血管和QIAamp核酸純化試劑盒

閱讀:1884發(fā)布時間:2018-1-26

對孕婦外周血中游離 DNA 進(jìn)行高通量測序(Next Generation Sequencing, NGS),并分析孕婦外周血中攜帶的胎兒的染色體突變異常風(fēng)險,特別是染色體非整倍體變異的檢測,是近幾年出現(xiàn)的無創(chuàng)產(chǎn)前篩查(NIPT)新技術(shù)。

 

NIPT產(chǎn)品

基于孕婦游離DNA的胎兒染色體非整倍體檢測(高通量測序法)流程及產(chǎn)品

血液標(biāo)本采集、運(yùn)輸、保存

血漿游離DNA提取純化

血漿游離DNA基因文庫構(gòu)建

文庫產(chǎn)物純化

基因測序

 

血液標(biāo)本采集、運(yùn)輸、保存

Streck Cell-Free DNA BCT® 血漿游離DNA采血管

產(chǎn)品英文名稱:Streck Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

產(chǎn)品中文名稱:Streck BCT® 血漿游離DNA采血管

貨號:218962,230253

 

Streck 血漿游離DNA采血管是一種直接提取的全血收集管,用于收集、運(yùn)輸和儲存血液樣本。Streck 血漿游離DNA采血管內(nèi)含防腐劑,它能穩(wěn)定有核血細(xì)胞,防止細(xì)胞基因組DNA的釋放,保護(hù)血漿游離循環(huán)DNA:cfDNA ctDNA和循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)。

230253是218962的升級版,是Streck公司新推將玻璃和塑料的*性能融合在一起的Fusion2TM混合塑料管。

 

成份

Streck 218962包含抗凝K3EDTA和細(xì)胞液體防腐劑。

 

材質(zhì)

Streck 218962管材是玻璃,Streck 230253管材是一種特制的混合塑料Fusion2,兼具玻璃的*優(yōu)點和塑料的安全性。

         

品牌

貨號

產(chǎn)品描述

包裝

Streck

218962

Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

Cell-Free DNA BCT®血漿游離DNA采血管

100管/盒

Streck

230253

Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

Cell-Free DNA BCT®血漿游離DNA采血管(混合塑料)

100管/盒

 

 

血漿游離DNA提取純化

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 循環(huán)核酸純化試劑盒

貨號: 55114 品牌:Qiagen

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (50)

For 50 preps: QIAamp Mini Columns, Tube Extenders (20 ml), QIAGEN Proteinase K, Carrier RNA, Buffers, VacConnectors, and Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml)

樣品處理量:5mL

洗脫體積:20-150μL

可以洗去PCR抑制物,如:二價陽離子和蛋白

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸純化試劑

從人類血漿或血清中濃縮和純化游離DNA和RNA

 

濃縮的核酸,高上樣量,低洗脫體積

回收DNA和RNA碎片

無需有機(jī)提取或乙醇沉淀

*去除污染物和抑制劑

 

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸純化試劑盒大大簡化了從血漿或血清中濃縮和純化游離DNA和RNA的過程。

 

性能

分析血液中腫瘤特異性的胞外DNA片段和mRNA可對普通血液樣品進(jìn)行特異性地腫瘤類型檢測。這些存在于血清或血漿中的游離核酸通常都是<1000 bp(DNA)或<1000 nt(RNA)的片段。此外,小至21 nt的miRNAs可作為某些癌癥和疾病狀態(tài)的生物標(biāo)記。

 

經(jīng)純化和濃縮的游離DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他雜質(zhì),可即用于各種下游應(yīng)用,包括:

PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR

用于基于血液樣品的癌癥生物標(biāo)記的研究、驗證和檢測

病毒核酸檢測

 

原理

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸純化試劑盒簡化了從血漿或血清中純化游離DNA和RNA的過程。核酸特異性結(jié)合到QIAamp Mini離心柱上,污染物流走。PCR抑制物,如:二價陽離子和蛋白,可通過三步有效的洗滌步驟被*去除,結(jié)合在離心柱上的純核酸可用水或試劑盒中的緩沖液洗脫。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid技術(shù)從人類血漿、血清或尿液中獲得游離的DNA和RNA。

 

應(yīng)用

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸純化試劑盒可從含低濃度DNA和RNA碎片的原始樣本(人血漿中常規(guī)游離DNA的濃度為1–100 ng/ml)中純化和濃縮游離的DNA、RNA、miRNA,包括病毒核酸。起始樣本體積至多5 ml。

 

適用樣本

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸純化試劑盒可從以下樣本類型中純化和濃縮核酸:

人類血漿

血清

尿液

 

NIPT介紹

NIPT發(fā)展

NIPT發(fā)展迅速,而且它還不是標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)療項目,只是一個選擇項目。

NIPT發(fā)展快速得異常,消費(fèi)者在推進(jìn)??赡茉颍和缴缃幻襟w發(fā)展,討論較多。

NIPT應(yīng)用

NIPT在實際運(yùn)用中要解決的問題:

市場壓力

專業(yè)指南的快速變化。高風(fēng)險孕婦和一般孕婦做咨詢用的時間都不一樣。那么獲得的信息也不同。孕婦查出有問題不一定要終止妊娠,還可以多做應(yīng)對準(zhǔn)備。而且做繼續(xù)懷孕決定的比例達(dá)到了40%。

NIPS在產(chǎn)前檢測中的準(zhǔn)確定位。一開始定位是高危產(chǎn)婦,之后不是高危產(chǎn)婦也對NIPT有興趣。中等風(fēng)險妊娠群體的NIPT檢測,還會再上升。

NIPT的檢測

NIPT的檢測還不是準(zhǔn)確。

低風(fēng)險用戶越多,PPV值越低。

生物學(xué)原因?qū)е碌哪阁w的miccroduplications也會影響檢測結(jié)果。

NIPT和標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)前檢測項目的比較

標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)前檢測項目:血清生化檢測和nuchal translucency超聲波檢查。

NIPT在在某些檢測方面的錯誤率格外低,比如cfDNA陽性預(yù)測方面比標(biāo)準(zhǔn)項目做得好。

NIPT的可選項目:性染色體

常規(guī)染色體非整倍體異常項目:21- 三 體 綜 合 征(trisomy 21,T21)、18-三體綜合征(trisomy 18,T18)和 13-三體綜合征(trisomy 13,T13)。

檢測可選項目:性染色體等。NIPT能比超聲波更早知道是否有性別染色體異常。

NIPT技術(shù)

美國NIPS的四個公司:4種技術(shù)。檢測錯誤率差別較大。

Illumina:WGS 全基因組測序

Sequenom:WGS 全基因組測序

Ariosa Diagnostics:targeted approach on a microarray 微陣列靶向方法

Natera:targeted sequencing for SNP 靶向測序檢測單基因

 

參考文獻(xiàn)

1.染色體非整倍體無創(chuàng)產(chǎn)前檢測技術(shù)質(zhì)控要點及臨床應(yīng)用進(jìn)展.曲守方; 于婷; 孫楠; 李麗莉; 陳芳; 吳英松; 黃杰.分子診斷與治療雜志.

2.Cell-free DNA screening blooms in expansion to low-risk pregnancies,Anne Paxton,2017 Issues, ARTICLES, March 2017.

 

Streck 218962(現(xiàn)貨),230253 Cell-Free DNA BCT采血管及更多無創(chuàng)產(chǎn)前檢測產(chǎn)品歡迎您咨詢華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司 紅榮微再以“傳遞科學(xué)價值,服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨主營干細(xì)胞、醫(yī)療、細(xì)胞治療、器官再生四大板塊的產(chǎn)品。

 


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