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南京信帆生物技術有限公司
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可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒太了

時間:2017/9/19閱讀:1190
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可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒基本信息

MALISZEWSKI等于1985年又從人血漿中發(fā)現(xiàn)了與單核細胞表面的CD14(membrane CD14,mCD14)結構相似的可溶性CD14(soluble CD14,sCD14)[2]。但是當時人們并不知道CD14的具體功能。直到1990年,WRIGHT等人才次發(fā)現(xiàn)CD14可作為LPS/LPS結合蛋白(LPS-binding protein,LBP)復合物受體,介導LPS性細胞反應。

可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒檢測技術簡介

雙抗體夾心法

  1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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