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MTT細胞增殖檢測試劑盒多能檢測多少樣本

時間:2020/8/31閱讀:1342
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MTT細胞增殖檢測試劑盒多能檢測多少樣本

MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲臜,用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。

產品簡介:
MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過酶標儀可以測定490nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。

使用說明:
1.收集對數(shù)期細胞,調整細胞懸液濃度,分于96孔板,每孔180μL,3000-10000個細胞/孔。
2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24小時。
3.加入適當濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清,加入90μL新鮮培養(yǎng)液,再加入10μL MTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。
5.然后吸掉上清,每孔加入110μL Formazan溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,使結晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液),每組設定3復孔。

注意事項:
1.由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
2.MTT溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。Formazan溶解液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。

2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和kou罩操作。

MTT細胞增殖檢測試劑盒多能檢測多少樣本

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