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牛奶是我們?nèi)粘Ｉ钪惺殖Ｒ姷囊环N飲料，其營(yíng)養(yǎng)豐富，能夠補(bǔ)充人體日常所需的蛋白質(zhì)，補(bǔ)充鈣質(zhì)等等。牛奶還是非常棒的早餐飲品之一，同時(shí)晚上睡覺之前喝一杯溫?zé)崃说呐Ｄ?，還具有安神的效果，能美美的香香的睡上一覺。

而牛奶中會(huì)含有一種甲砜霉素，為白色到類白色結(jié)晶性粉末或晶體。甲砜毒素在臨床上主要用于治療呼吸、泌尿、肝膽、傷寒等腸道外科、婦產(chǎn)科和五官科感染等癥，特別對(duì)中輕度感染作用尤其明顯。

服用甲砜霉素可發(fā)生腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等消化道反應(yīng)，其發(fā)生率在10%以下。本品亦可引起造血系統(tǒng)的毒性反應(yīng)，主要表現(xiàn)為可逆性的紅細(xì)胞生成抑制，白細(xì)胞和血小板減少等。
因此通過有效的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段，對(duì)牛奶中的有關(guān)甲砜霉素殘留進(jìn)行監(jiān)控，以確保消費(fèi)者對(duì)牛奶消費(fèi)的安全具有重要意義。

適用范圍
適用于牛奶中甲砜霉素殘留量的檢測(cè)。

溶液的配置
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1mg/ml）：稱取甲砜霉素對(duì)照品（15318-45-3）10mg，置于10ml容量瓶中，用乙腈定容至刻度。儲(chǔ)藏條件2-8℃，保質(zhì)期一個(gè)月。
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液（100μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0ml至10ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度。
甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液（10μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0ml至100ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度。

提取步驟
純牛奶：稱取試樣5g至50ml離心管中，加乙酸乙酯20ml，渦旋混勻2min，8000r/min離心5min，將上清液轉(zhuǎn)移至100ml雞心瓶中；再次重復(fù)上述提取步驟兩次。合并三次提取液，于45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干；雞心瓶中殘液加入5ml水，超聲5min使之充分溶解，再向雞心瓶中加入10ml正己烷，一并轉(zhuǎn)移至50ml離心管中；再加5ml水與10ml正己烷于雞心瓶中重復(fù)溶解后轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混勻2min，4000r/min離心2min，取下層清夜待凈化。

SPE凈化步驟

活化：5mL乙腈，5mL水，棄去
上樣：待凈化液全部上樣，棄去
淋洗：2mL水（潤(rùn)洗離心管），棄去，抽干
洗脫：10mL乙腈，收集于15ml離心管中，氮吹吹干,用流動(dòng)相定容至1mL，并過0.45 μm濾膜，上HPLC檢測(cè)


色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）
流動(dòng)相：水/乙腈=(4/1)
流速：1.0mL/min
柱溫：30℃
進(jìn)樣量：20μL
檢測(cè)波長(zhǎng)：225nm

色譜圖及加標(biāo)回收率結(jié)果

圖1.甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)品500μg/L譜圖

圖2.牛奶樣品加標(biāo)2.0mg/kg譜圖（SPE柱：BRP）

表1：牛奶樣品BRP小柱處理加標(biāo)回收率

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