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一、適用范圍

適用飼料中氯霉素的測定（本實驗采用復合飼料為樣品）

參考標準：《農(nóng)業(yè)部2438號公告-8-2016 飼料中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》

二、提取步驟

1）稱取5g樣品于50mL離心管中，加入20mL乙酸乙酯，渦旋混勻，超聲10min，離心8000r/min（10min），取上清液于雞心瓶中；再用20mL乙酸乙酯分兩次重復提取，合并上清液，加入0.5mL氨水，混勻，于45℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干。

2）加入1.5mL甲醇，混勻，再加入3.5mL4%氯化鈉溶液溶解，轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，加入5mL正己烷振蕩，離心6000r/min（10min），去除正己烷層；再加入5mL正己烷重復操作，后加入0.5mL氨水，混勻，待凈化。

三、SPE凈化步驟

SPE柱：月旭Welchrom® BRP 規(guī)格：60mg/3mL；

活   化：3mL 甲醇、3mL 水，棄去；

上  樣：待凈化液 全部上樣，控制流速，不宜過快，棄去；

淋  洗：2mL水，1mL甲醇-乙腈-水-氨水溶液，棄去，并抽干小柱；

洗   脫：3mL5%氨化甲醇洗脫，抽干。

45℃水浴氮氣吹干，用40%甲醇水定容至1mL，過0.22μm有機濾頭，待上機。

四、色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate® XB-C18 ,4.6*250mm,5μm；

流動相：甲醇-水（40-60）；

流   速：1.0mL/min；

柱   溫：30℃；

進樣量：20μL；

檢測波長：280nm。

五、色譜圖或者加標回收率結(jié)果

六、相關(guān)產(chǎn)品信息