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農(nóng)藥殘留量快速檢測-酶抑制率法(分光光度法)

在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正比。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

試劑

*pH8.0緩沖溶液分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與３.２g磷酸二氫鉀，用1000mL蒸餾水溶解。

*顯色劑分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氫鈉，用20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。

*底物：取25.0mg硫代乙酰膽堿，加3.0mL蒸餾水溶解，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

*乙酰膽堿酯酶根據(jù)酶的活性情況，用緩沖溶液溶解，3min的吸光度變化ΔA0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>