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蛋白純化儀已經(jīng)可以實現(xiàn)規(guī)?；僮?/h2>

閱讀：182      發(fā)布時間：2022-10-26

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　　蛋白純化儀可用于分離膜蛋白、酶、動物、植物和細(xì)菌的受體，還可以替代一些分離方法如硫酸銨分級法作為純化蛋白的*步，與色譜方法聯(lián)用。

　　另外，蛋白純化儀已經(jīng)可以實現(xiàn)規(guī)模化操作。成功地進(jìn)行了膽固醇氧化酶濁點萃取的中試研究。雖然使用離心分離器可以使CPE大規(guī)模連續(xù)進(jìn)行，但商品離心分離器用于CPE 的效率和容量仍需進(jìn)一步研究。

　　而且，發(fā)現(xiàn)相分離操作受細(xì)胞培養(yǎng)時產(chǎn)生的表面活性物質(zhì)影響較大，體系兩相間密度差較小，表面張力較小，含產(chǎn)物的表面活性劑相的流變學(xué)行為較復(fù)雜，操作較難。

　　蛋白純化儀根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進(jìn)行分離蛋白質(zhì)在不同pH環(huán)境中帶電性質(zhì)和電荷數(shù)量不同，可將其分開。

　　1、電泳法

　　各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下，因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳，這是利用一種兩性電解質(zhì)作為載體，電泳時兩性電解質(zhì)形成一個由正極到負(fù)極逐漸增加的pH梯度，當(dāng)帶一定電荷的蛋白質(zhì)在其中泳動時，到達(dá)各自等電點的pH位置就停止，此法可用于分析和制備各種蛋白質(zhì)。

　　2、離子交換層析法

　　離子交換劑有陽離子交換劑和陰離子交換劑，當(dāng)被分離的蛋白質(zhì)溶液流經(jīng)離子交換層析柱時，帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質(zhì)被吸附在離子交換劑上，隨后用改變pH或離子強(qiáng)度辦法將吸附的蛋白質(zhì)洗脫下來。