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腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項

時間:2017/6/1閱讀:572
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腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項
1.    玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;
2.    無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時以上;
3.    培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養(yǎng)基內,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內培養(yǎng)2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置4度保存;
4.    消化液(pH7.8)或其它加入液,應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,分裝成支置-20度保存;
5.    培養(yǎng)箱應先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應照射1小時以上,如有高溫滅菌的應按程序來菌)。至少每月一次。
6.    進入操作時應注意先清洗雙手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作時注意無菌臺內空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往,如果數(shù)量較多,培養(yǎng)瓶應放在與酒精燈平行地方便于操作,瓶與瓶之間應相隔一定的距離,開瓶(蓋)時應先用75%酒精反復擦拭或用燈燒,打開后應用燈先燒口,然后燒蓋。用完后同樣操作。腫瘤細胞整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點。
Ana-1(小鼠巨噬細胞)    5×106cells/瓶×2
Anglne(人卵巢癌細胞)    5×106cells/瓶×2
AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞)    5×106cells/瓶×2
ARPE-19(人視網膜上皮細胞)    5×106cells/瓶×2
AsPC-1(人胰腺癌細胞)    5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)    5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤細胞)    5×106cells/瓶×2
Bcap-37(人乳腺癌細胞)    5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌細胞)    5×106cells/瓶×2
腫瘤細胞

 

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