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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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腫瘤細(xì)胞表面染色

時(shí)間:2018/2/24閱讀:907
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收集各組腫瘤細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),加入適量 Wash Buffer 液洗滌,1500 rpm 離心 5 min,去上清,加入 50 μl Wash Buffer 重懸。

(可選)Live dead 染色,每管加 0.1 μL Zombie GreenTM Dye(樣品多時(shí)使用時(shí)可先稀釋),震蕩混勻,室溫避光孵育 10~15 min。Wash Buffer 液洗滌,1 500 rpm 離心 5 min,棄上清。

封閉 Fc 受體:每管中加入 1 μg/106 細(xì)胞 Anti-Mouse CD16/CD32 抗體封閉熒光抗體 Fc 受體引起的非特異性染色。震蕩混勻,4℃ 孵育 30 min(或室溫避光 15 min)。Wash Buffer 液洗滌,1 500 rpm,離心 5 min,棄上清。

用適量體積 Wash Buffer 液重懸每個(gè)樣本,將各組細(xì)胞等細(xì)胞數(shù)混合后分裝到單染管和不染抗體管,作為流式檢測時(shí)調(diào)節(jié)電壓。

單染管中加入相應(yīng)表面染色抗體,同時(shí)在每個(gè)樣本中加入 1 μL percp CD3/106 細(xì)胞和 0.5 μL PE CD4/106 細(xì)胞,震蕩混勻,4℃ 避光孵育 30 min(或室溫避光 15 min)。

用 Wash Buffer 液洗滌,1500 rpm 離心 5 min,棄上清。

腫瘤細(xì)胞打孔或者加入 200 μL 1% PFA(多聚甲醛)固定過夜。
61336-70-7    Amoxicillin    阿莫西林標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
69-53-4    Ampicillin    氨芐青霉素標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
7177-48-2    Ampicillin Trihydrate    氨芐青霉素三水酸標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
121-25-5    Amprolium    安普羅銨標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
120511-73-1    Anastrozole    阿那曲唑標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
    Anecortave Acetate    醋酸阿奈可他標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
154-68-7    Antazoline Phosphate    磷酸安他唑啉標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1143-38-0    Anthralin    地蒽酚標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
60-80-0    Antipyrine    安替比林標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
88495-63-0    Artesunate    青蒿琥酯標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
腫瘤細(xì)胞

 

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