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DNA指導(dǎo)聚合酶δ1(POLd)重組蛋白小鼠

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 08:29:09瀏覽次數(shù):968次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2743 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Polymerase DNA Directed Delta 1 (POLd)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
DNA指導(dǎo)聚合酶δ1(POLd)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:FBXO24蛋白抗體 英文名稱:FBXO24 0.2mlFBXO27蛋白抗體 英文名稱:FBXO27 0.2ml成纖維細(xì)胞生長因子受體3抗體 英文名稱:FGFR3 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant oisomerase I (1)產(chǎn)品名稱:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(1)重組蛋白物種:Human,人I; DNA oisomerase 1

Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種:Sheep,綿羊CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C

Recombinant Calcium Activated Nucleotidase 1 (CANT1)產(chǎn)品名稱:鈣激活核苷酸酶1(CANT1)重組蛋白物種:Human,人SCAN1; SHAPY; CAN1; Soluble Ca-Activated Nucleotidase,Isozyme 1; Apyrase homolog; Putative MAPK-activating protein PM09; Putative NF-kappa-B-activating protein 107

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

DNA指導(dǎo)聚合酶δ1(POLd)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D2743

 

 

英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Delta 1 (POLd)

CDC2; POLD1; DNA polymerase subunit delta p125

型號:GOY-01D2743

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:29.1kDa

實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser29~Gly260 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:4.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

細(xì)菌粉/Bacto-AgarBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口

(S,S)-帕洛諾司瓊鹽鹽-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 (S,S)-Palonosetron Hydrochloride Labeled d4

 SPC-A-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

N-氧基帕洛諾司瓊 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Palonosetron N-Oxide

 PANC-1, 人胰腺細(xì)胞gersion

二鈉 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Pemetrexed Disodium

 PC-3M-2B4(人前列腺低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2

帕珠 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Pazufloxacin

 MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

二鈉-d5 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Pemetrexed-d5 Disodium Salt

 MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

-15N,13C5 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Pemetrexed - Labeled 15N,13C5

 ME-180(人子宮頸表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

磺噻唑鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Sulfathiazole sodium salt

 HK-2, 人腎質(zhì)近曲小管上細(xì)胞

匹格列-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Pioglitazone-d4

DNA指導(dǎo)聚合酶δ1(POLd)重組蛋白小鼠人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(含小倒管) Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包

1瓶 L929細(xì)胞株 L929 低溫運輸和保存

50T 副傷寒桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

25mg 核糖核酸 A,牛胰 RNase A,Bovine Pancreas  室溫干燥保存

WORT肉湯 Wort Broth 250g

乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基 Lactobacillus Agar Medium 250g

糞腸球菌瓊脂 Enterococcus faecalis Agar 250g

大鼠蛋白激G(PKG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

20次 裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒(含高效轉(zhuǎn)化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫

豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

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