進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL原理：

采用雙抗體夾心法測定人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）水平。用純化的人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）抗體包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品，并加入HRP標(biāo)記的ABP抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，再用硫酸終止反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算測試樣品中ABP濃度。 

實驗材料與試劑配制：

儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

緩沖液使用：加5ul的緩沖液于50ul的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。

混勻，靜置1小時備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。

洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。

樣品收集、處理及保存：

細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。

血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上
清。

體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000rmp離心20分鐘，收集上清進行檢測。

樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。