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新生牛血清濃度的選擇

閱讀:1534      發(fā)布時間:2019-5-24
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胎牛血清和新生牛血清都是細(xì)胞常用的天然培養(yǎng)基。胎牛血清常用于較難養(yǎng)、比較嬌氣的細(xì)胞和干細(xì)胞,新生牛血清通常適用于比較好養(yǎng)的細(xì)胞,特別用于病毒疫苗的工業(yè)生產(chǎn)以及廣泛的科研領(lǐng)域。在實(shí)際應(yīng)用中,常需要確定牛血清的濃度。常用濃度為5%~20%,也有用更低濃度的牛血清,這主要依賴于所用的人工合成培養(yǎng)基的類型、組成和營養(yǎng)程度。如果合成培養(yǎng)基的營養(yǎng)較豐富,那么可適當(dāng)降低牛血清的濃度。它也依賴于所培養(yǎng)的細(xì)胞類型和培養(yǎng)的目的。下面以水牛卵母細(xì)胞為例。

 

在2008年,廣西大學(xué)等單位曾報(bào)道了不同濃度牛血清和白蛋白對水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。卵母細(xì)胞的體外成熟是胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

 

研究人員將經(jīng)卵母細(xì)胞清洗2--3遍后,放入預(yù)先平衡過的不同濃度的牛血清(ECS,F(xiàn)CS,注:ECS為發(fā)情牛血清)及牛血清白蛋白(BSA)的成熟培養(yǎng)液中,其中對照組采用基礎(chǔ)培養(yǎng)液;并放入39℃、含5%CO及飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)?;A(chǔ)培養(yǎng)液為TCM199中加入一定量的激素(LH,F(xiàn)SH,雌二醇)。培養(yǎng)方式為微滴培養(yǎng)法,在60mm培養(yǎng)皿中作12~16個滴,每滴放30--40枚卵丘一卵母細(xì)胞復(fù)合體,并在培養(yǎng)液滴上面覆蓋石蠟油。

 

研究人員觀察了在基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加不同牛血清及其濃度分別0(對照),10%ECS,20%ECS,10%FCS,20%FCS對水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。結(jié)果顯示:10%ECS,20%ECS,10%FCS組的細(xì)胞成熟度顯著高于對照組,又以10%ECS組為突出。隨著FCS血清濃度的增加,成熟度逐漸提高,但無顯著差異。作者認(rèn)為,添加血清是必要的,但不需太高的濃度。

 

可見,設(shè)定一個觀測指標(biāo),進(jìn)行濃度梯度試驗(yàn),是可以找到一個濃度的。

 

 

品名:Ausbian精制新生牛血清

貨號:VS500N

批號:1712A

規(guī)格:500ml/瓶

市場價:1600元

歡樂價:800元

*活動:買10瓶送3瓶,100瓶送40瓶

 

上海締一生物生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清(貨號:VS500N)為澳洲進(jìn)口,血源來自新西蘭,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,如檢測總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等,確保營養(yǎng)的同時不含病原體,指標(biāo)達(dá)標(biāo),經(jīng)廣泛使用,受到好評。

 

參考文獻(xiàn)
李曉霞,等. 不同濃度的牛血清及牛血清白蛋白對水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008,7:108-116

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