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細胞培養(yǎng)之支原體檢測方法~支原體檢測qPCR

閱讀:1381      發(fā)布時間:2022-3-15
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在生物制品和細胞治療領(lǐng)域,支原體檢查是保證產(chǎn)品和治療安全的重要一環(huán)。生物源性原材料、采用細胞培養(yǎng)技術(shù)制備的疫苗、抗體,以及細胞或基因治療產(chǎn)品在生產(chǎn)過程的不同階段都要進行支原體污染的檢查


接下來,本小助將為大家講解各種支原體檢測的方法比較。


一, 支原體熒光定量PCR,即qPCR.

其原理是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。

它的優(yōu)點是準確度很高,特別是德國MB的試劑盒,靈敏度可以達到10CFU/ml以上。

特異性強,*涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),根據(jù)序列一致性,至少可以檢測到107種支原體物種。與細菌和真核DNA無交叉反應。

操作簡單,只需配備qPCR儀。

時間短,2-3小時可以出結(jié)果。


唯yi的限制,因為檢測的是支原體的DNA,所以無法區(qū)分活的支原體。但生物制品在生產(chǎn)過程中,本身不應該產(chǎn)生支原體污染,污染過也不行,所以這個限制反而變成了優(yōu)點。


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