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牛血清白蛋白能維持蛋白的穩(wěn)定性

閱讀:3389      發(fā)布時間:2019-5-26
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      牛血清白蛋白是生化實驗室常用的蛋白之一,而實驗中,可能因為它過于常見、過于平凡而忽略了它的重要性。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在westernblot中作為Blockingagent。
  牛血清白蛋白前體蛋白全長607個氨基酸。前體蛋白從N端脫去18個信號肽,以及6個前肽,形成含有583個氨基酸、分子量約為66.5kDa的成熟BSA蛋白。BSA表面含有大量的酸性、堿性氨基酸。其中酸性氨基酸谷氨酸、天冬氨酸分別有40個、59個,堿性氨基酸賴氨酸、精氨酸分別有59個、23個。另外BSA還有35個半胱氨酸,形成17對二硫鍵,一個游離的巰基。
  當?shù)鞍踪|處于“壓力”的狀態(tài)下,如加熱、紫外照射、氧化、剪切力等,蛋白質的空間折疊趨于延展,導致內部疏水位點暴露,發(fā)生無定形聚集或者形成高結構化的淀粉樣蛋白,從而失去生物活性。BSA具有良好的熱穩(wěn)定性,當溫度上升至65度時,其空間結構的變化依然是可逆的。BSA另一個特點是能夠和許多物質形成可逆結合,特別是水溶性較差的物質,如脂肪酸、血紅素、膽紅素、帶負電荷的芳香化合物等,能夠增加其水溶性。因此,BSA是理想的蛋白保護劑。當酶、或抗體等蛋白質發(fā)生空間結構變化,BSA能夠與其發(fā)生可逆結合,形成穩(wěn)定的、可溶的高分子復合物,防止蛋白發(fā)生無定形聚集。另外,溶液中的BSA能夠與容器表面結合,防止蛋白吸附在容器表面而濃度降低。

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