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有必要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活嗎?

閱讀:2139      發(fā)布時(shí)間:2020-6-22
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  血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。
  清熱滅活操作步驟:
  ①選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。
  ②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。
  ③溫度預(yù)試。對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
 ?、苎鍦缁?。血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí),定時(shí)30分鐘。
 ?、荽笃垦鍦缁詈?,進(jìn)行分裝。
  ⑥保存。分裝后,抽樣做無菌試驗(yàn),-20~-70℃保存。
  多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過試驗(yàn)來證實(shí)其必要性,確定滅活的適當(dāng)條件;在滅活過程中,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè),并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。
  

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