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技術(shù)文章

滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒的PCR反應(yīng)體系配制

閱讀:239          發(fā)布時(shí)間:2020-5-21

滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒的PCR反應(yīng)體系配制:

注:使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。

a)模板使用量:進(jìn)行基因組上的目的片段檢測,建議使用少量的血液量作為模板;檢測血液樣本中某種病毒或細(xì)菌等的目的片段,建議擴(kuò)大PCR體系并使用較大量的血液模板。血液模板多占PCR體系的45%(人血)、20%(鼠血)。若模板使用含有血液的采集卡,可截取直徑1-4 mm的血點(diǎn),直接加入20-50 μL PCR反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增。

b)引物濃度:通常引物終濃度為0.2 μM,也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM之間進(jìn)行調(diào)整。

c)反應(yīng)體系:推薦使用20 μL或 50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。

d)體系配制:配制好PCR反應(yīng)體系,置于渦旋儀上渦旋混勻,瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。

 

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