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影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果標(biāo)本的采集、貯存

閱讀:214          發(fā)布時(shí)間:2017-4-7

(1)進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒標(biāo)本溶血  由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的 ELISA 測定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。

(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染  因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果(信帆生物)。

(3)標(biāo)本保存不當(dāng)  在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中 IgG 可聚合成多聚體、AFP 可形成二聚體,在間接法 ELISA 測定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時(shí)間過長(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA 測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于 4℃,1 周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,(上海信帆生物)不可強(qiáng)烈振蕩。

(4)標(biāo)本凝集不全  進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后 1/2~2 h 開始凝固,18~24 h *凝固。上海信帆生物提供ELISA樣本收集方法。臨床檢驗(yàn)工作中,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在 ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響  抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如 NaN3 可抑制 ELISA 系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對 ELISA 測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗(yàn) ELISA 測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒從而為臨床提供正確可靠的檢測結(jié)果。

 

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