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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人原代硬腦膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP4216 |
人原代硬腦膜成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代硬腦膜成纖維細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代硬腦膜成纖維細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用人原代硬腦膜成纖維細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
細胞實驗步驟：
一、細胞復(fù)蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；
2.預(yù)熱培養(yǎng)基；
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
4.將凍存細胞從液氮罐中取出；
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；
9.1000r/min,離心5min；
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
11.吸棄上清液；
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；
13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
注意事項：
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體
Pacific Blue標(biāo)記人CD57單克隆抗體
LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
人原代硬腦膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)
CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
細胞培養(yǎng)步驟：
?細胞復(fù)蘇?：
從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?：
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?：
當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。
棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。
加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。
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