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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司

你知道常用的雙染顯色系統(tǒng)有什么嗎?

時(shí)間:2023-9-1 閱讀:1936
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免疫組化雙染技術(shù)是常用的免疫組化方法之一,它可以通過(guò)使用兩種不同種屬的一抗、兩種不同種屬的二抗系統(tǒng)和不同顏色的顯色系統(tǒng),同時(shí)檢測(cè)組織切片中兩種或多種抗原的表達(dá)情況。那么,目前常用的雙染顯色系統(tǒng)有什么呢?讓我們一起來(lái)看看吧!

一、辣根過(guò)氧化物酶(HRP)檢測(cè)系統(tǒng)

辣根過(guò)氧化物酶(HRP)是一種能將過(guò)氧化氫(H2O2)分解為氧氣(O2)和水(H2O)的過(guò)氧化物酶。HRP可以使用DAB作為氫供體,H2O2作為底物,最終產(chǎn)生棕黃色的抗原-抗體結(jié)合的產(chǎn)物。

圖片1.jpg

二、堿性磷酸酶(AP)檢測(cè)系統(tǒng)

DAB在臨床應(yīng)用中也有局限性。當(dāng)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性較高或黑色素含量較高時(shí),DAB不是最jia選擇,應(yīng)采用其他顯色劑或堿性磷酸酶。例如,在黑色素瘤的免疫組化診斷中,DAB顯示的棕色沉淀物與黑色素瘤表達(dá)的HMB45(或S-100)在顏色上難以區(qū)分。如果黑色素顆粒較多,很難判斷結(jié)果。因此,在富含黑色素的腫瘤中,使用紅色著色劑有助于更清楚地確定陽(yáng)性染色。AP系統(tǒng)使用固體紅、固體藍(lán)或BCIP/NBT作為著色劑。固紅染色陽(yáng)性結(jié)果為紅色,固藍(lán)、BCIP/NBT為藍(lán)色。

AP

AP催化固體紅顯色反應(yīng),將萘酚AS-MX磷酸水解為萘酚。萘酚與固體紅發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),在AP活性中心形成紅色不溶性沉淀。蘇木精免疫組化染色時(shí),雙染色系統(tǒng)固定效果較好。一是結(jié)合牢固,二是易于與DAB和蘇木精鑒別。

圖片2.png

免疫組化雙染技術(shù)的結(jié)果須建立在對(duì)陽(yáng)性對(duì)照切片、陰性對(duì)照切片成立的基礎(chǔ)上,進(jìn)行染色結(jié)果的判讀。更多有關(guān)免疫組化雙染顯色系統(tǒng)的相關(guān)產(chǎn)品,請(qǐng)聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:

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