小鼠腮腺原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

小鼠腮腺細胞分離自腮腺組織；腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的最大唾液腺，位于外耳道的前下方，下頜后窩內及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體；唾液腺有3對，腮腺、舌下腺和頜下腺，其中最大的一對是腮腺。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞，是一種營養(yǎng)需要復雜、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長，體外培養(yǎng)比較困難。目前，DMEM培養(yǎng)液被認為較適于腺細胞的培養(yǎng)。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化。另外，接種的細胞密度也是培養(yǎng)成功的關鍵因素之一，尤其是在腺細胞這種單層細胞培養(yǎng)時，接種的細胞總數量和生長基質表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞采用膠原酶-蛋白酶聯合消化后差速貼壁，結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腮腺細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

EPC, 大鼠血管內皮祖細胞 Rattus  Li-7 人肝癌細胞  人胰腺腺泡上皮癌;HPAC  MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15+15%FBS  人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n) 小鼠原代脊髓微血管內皮細胞 人原代肺成纖維細胞

補體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)

FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白

ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein

TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標簽)

COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein

大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 ，英文名： GLP1 ELISA Kit

Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠內皮素1(ET-1)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞漿免疫球蛋白

細胞ATP酶活性染色試劑盒50次

ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9

唾液酸（SA）測試盒（帶SA標準）   Saliva acid (SA) test case (with SA standard)

肝素溶液   Heparin solion

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube

小鼠腮腺原代細胞小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human peptidylprolyl CIS ans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)試劑盒

HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBcelldifferetiationfactor,BCDF試劑盒人B細胞分化因子(BCDF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性飼料油菜籽(rapeseed)試劑盒20次

Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白  Protein

Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原

FH重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標簽)

BLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。