LY294002(PI3K抑制劑)公司正在出售的產(chǎn)品：Sema6A/FITC 熒光標(biāo)記抗Sema6A抗體IgGBoc-L-天冬氨1-芐酯 98%
Sema7A/CD108/FITC 熒光標(biāo)記軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體IgGBoc-L-酪氨 98%
sFRP/FITC 熒光標(biāo)記抗內(nèi)膜抗體IgGBOC-D-纈氨 98%
SFRP1/FITC 熒光標(biāo)記分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體IgGBOC-L-

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
香菇腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊骨形成蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

黃色短桿菌半胱蛋白蛋白-12抗體Human  CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌角蛋白17抗體Human CD94 ELISA Kit山羊骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌CD38抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌CD38抗體Human CDC25A ELISA Kit山羊還原(GSR)免疫試劑盒

Paracoccus碳酐1抗體Human CD32 ELISA Kit山羊過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒

異常漢遜酵母碳酐2抗體Human CDC14B ELISA Kit山羊孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒

露濕漆斑菌絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體Human CEP68 ELISA Kit山羊睪(T)免疫試劑盒

玫瑰色紅球菌α-連環(huán)蛋白抗體（鈣粘蛋白相關(guān)蛋白）Catenin αHuman CEP290 ELISA Kit山羊肝脂(HL)免疫試劑盒

巨獸芽孢桿菌癌易感基因2相互作用蛋白抗體Human CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA Kit山羊膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)免疫試劑盒

肺炎鏈球菌質(zhì)連接蛋白1抗體Human CEP350 ELISA Kit山羊催乳(PRL)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌盤狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體Human  CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒

清酒假絲酵母膜糖蛋白CD200抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒

布拉克須霉胰羧肽A1抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊促生長(zhǎng)激釋放激(GHRH)免疫試劑盒

干酪乳桿菌羧肽A2抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)免疫試劑盒

茄鏈格孢腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體Human CD94 ELISA Kit山羊促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒

副流感病毒Respirovirus│Parainfluenza virus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPodocin 蘿卜硫

黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質(zhì)量規(guī)格：BRPL7抗體/抗蘇酰tRNA合成試劑盒羅丹明B

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：BRPL12抗體/抗酰tRNA合成試劑盒六氫吡啶羧
LY294002(PI3K抑制劑)鏈霉 (R,R)-2,6-雙(4-苯基-2-噁唑啉-2-基)吡啶磷酸化AKT蛋白Elisa

芽孢桿 (S)-(+)-2-(苯基)吡咯烷磷酸化c-Jun氨基末端激Elisa

茯苓 乙酸(1R,2S)-2-[N-芐基-N-(苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[交叉反應(yīng)用試劑]磷酸化IKB alphaElisa

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 (R)-(+)-α,α-二苯基脯氨磷酸化N-甲基-D-天冬氨酸Elisa

戊糖乳桿 R-1,1'-聯(lián)-2-萘酚磷酸化p38絲裂原活化蛋白激Elisa

側(cè)耳 (1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙磷酸化Tau蛋白Elisa

嗜冷德沃斯氏 (1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙磷酸化α-氨基羥甲基惡唑酸Elisa

釀酒酵母 (+)-2,2'-[(3aR,8aS)-3a,8a-二氫-8H-茚苯[1,2-d]并噁唑磷酸化酪氨酸激Elisa

長(zhǎng)枝木霉 (S,S)-N,N'-雙(三氟磺酰)-1,2-二苯基乙二磷酸化酪氨酸激Elisa

芽胞桿 (-)-苯并四咪唑磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Elisa

*蛹蟲草 (2S,3S)-(+)-2,3-雙(二苯基膦基)雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Elisa

產(chǎn)薩頓 (2R,3R)-(-)-2,3-雙(二苯基膦)雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa

施氏假單胞 (+)-苯并四咪唑磷酸肌酸激Elisa

芽孢桿 (2S,3S)-(-)-雙(二苯基膦)丁烷磷酸激1Elisa

嗜鹽鹽單胞 (1S,2S,4S,5S)-2,5-雙(3,5-二叔丁基-2-羥基苯亞甲基氨基)雙環(huán)[2.2.1]庚磷酸烯式酮酸羧激Elisa