小鼠角膜成纖維原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代角膜成纖維細胞 小鼠垂體瘤細胞 英文名稱： AtT20 人食管癌組織源細胞培養(yǎng)試劑盒 人食管癌組織源細胞培養(yǎng) 大鼠肝動脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL 脊髓星形膠質細胞 大鼠原代嗅上皮細胞

小鼠角膜成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠角膜成纖維細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠角膜成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠角膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13 人胰島β細胞 L6大鼠成肌細胞 L6 rat skeletal myoblasts DMEM+10%FBS  MMP8 Others Human 人 MMP8 / CLG1 人細胞裂解液   IL32 Protein Human 人支氣管平滑肌細胞永生化細胞 大鼠原代牙髓干細胞

phospho-GSK-3 Beta(pSer9 0.5mgphospho-GSK-3 Beta(pSer9) 0酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原

BOLA1 Protein Human 重組人 BOLA1 蛋白 (His 標簽)

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標簽)

PMP2重組人 PMP2 / FABP8 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠骨保護素(OPG)試劑盒 ，英文名： OPG ELISA Kit

Rabbit ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 兔子白介素2(IL-2)試劑盒

人細小病毒(B19)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-3Beta/ELC/CCL19(Mousemacrophageinflammatoryprotein3Beta)ELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白3β

體液結構型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIL-6犬白介素6

豬載脂蛋白B（Apo-B）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬孕（PROG）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬孕激素（P）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠角膜成纖維原代細胞豬血栓素A2(TXA2)試劑盒

Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒

Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子腎上腺髓質素(ADM)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形體IgM抗體

血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量試劑盒20次

Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒

TNFRSF4重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標簽) Protein

RAD23同源物B(RAD23B)重組蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

GMFB重組人 GMFB 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

CX3CL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)