小鼠成骨原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠成骨細胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結構，構成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質溶解礦物質，分泌蛋白酶消化骨基質，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質，骨基質礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠成骨細胞采用先用蛋白酶短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠成骨細胞經ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

SF9, 昆蟲卵巢細胞 人癌細胞，MCF7B細胞 hFOB 1.19(人SV40轉染成骨細胞)  CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細胞裂解液   CSC, 小鼠心肌細胞 人小腸頸部表皮樣癌細胞，Ca Ski細胞 兔原代肺大動脈外膜成纖維細胞 小鼠原代神經干細胞

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

B3GNT2 Protein Human 重組人 B3GNT2 蛋白

IFNA1重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白  Protein

TCN2 Protein Mouse 重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 (His 標簽)

IGJ重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠果糖二0酸縮酶C(ALDOC)試劑盒 ，英文名： ALDOC ELISA Kit

Rat Apelin 12 (AP12) ELISA Kit 大鼠apelin 12(AP12)試劑盒

Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit 大鼠β樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforENA-Ab(Humanai-exactablenuclearaigenaibody)ELISAKit人抗可提取核抗原抗體

細胞絡0酸酶(TP)活性比色法定量試劑盒20次

RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)試劑盒

植物RNA提取試劑盒(溶液法）   24ml

PlanNAplus   40ml

質粒大量提取試劑盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

小鼠成骨原代細胞鴨白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuroblastoma aibody (NB-Ab) ELISA Kit 人抗神經母細胞瘤抗體(NB-Ab)試劑盒

HumanGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 人γ氨基(GABA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAChRab(Humanacetylcholinereceptoraibody)ELISAKit人乙酰受體抗體

鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試劑盒5/10次

Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ENPEP重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (His 標簽) Protein

彈性蛋白酶4(ELA4)重組蛋白 Recombinant Elastase 4 (ELA4)

JTB重組人 Jumping Translocation Breakpoint / JTB 蛋白  Protein

CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽)

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白