小鼠椎間盤髓核原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代椎間盤髓核細(xì)胞 細(xì)胞名稱 種屬 人晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 淋巴管成纖維細(xì)胞 大鼠原代肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠椎間盤髓核原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠椎間盤髓核細(xì)胞分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng)，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤髓核細(xì)胞采用膠原酶-蛋白酶混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤髓核細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88 肝癌細(xì)胞，BEL-7405細(xì)胞 MEF細(xì)胞，早代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞  DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 人原代聽神經(jīng)瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞 大鼠原代角膜基質(zhì)細(xì)胞

POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)重組蛋白 Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

GSK3B重組小鼠 GSK3B 蛋白 Protein

PDCD1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

TNFRSF19重組人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARL)試劑盒 ，英文名： ARL ELISA Kit

Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

牛特定基因序列(Bovine)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMAGAb(Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody)ELISAKit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體

體液(NO)活性熒光定量試劑盒50次

ELISAKitEMP紅細(xì)胞膜蛋白

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒   96T/48T

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)試劑盒   96T/48T

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)試劑盒   96T/48T

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）試劑盒   96T/48T

小鼠椎間盤髓核原代細(xì)胞小鼠(FA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 人芳香烴受體(AhR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor16-AlphaOHE-1(Human16-AlphaHydroxyesogen1)ELISAKit人16α羥基雌同1

飲料鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量試劑盒20次

MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

LEP重組人 Leptin 蛋白 Protein

糖原0酸化酶M(PYGM)重組蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

AOC1重組人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。