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Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G
由于螢火蟲熒光素酶的超靈敏性，快速和易于使用的體系，在研究基因表達(dá)方面螢火蟲熒光素酶是zui常用的報(bào)告基因之一。熒光素酶被用來監(jiān)測(cè)細(xì)菌，培養(yǎng)細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因植物或動(dòng)物的啟動(dòng)子活性反應(yīng)。熒光素酶是一個(gè)61kDa大小的蛋白，它的活性形式是單體，且不需要其它的加工修飾。

Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G

 

生物發(fā)光反應(yīng)

幾個(gè)因素將會(huì)影響反應(yīng)的靈敏度，包括溫度，pH或底物濃度。為得到*結(jié)果，在使用之前我們建議用pH7.8的緩沖液，并且所有試劑在室溫下預(yù)熱。為充分反應(yīng)，我們建議在分析緩沖液中加入過量的ATP和Mg²⁺。

當(dāng)熒光素加入到熒光素酶樣品中，會(huì)看到瞬間閃光在0.3-0.5秒內(nèi)達(dá)到峰值強(qiáng)度。這光將隨著半衰期0.5-1.0分鐘左右很快消失。但是初始如果在分析buffer中加入輔酶A，將能阻止快速反應(yīng)延長(zhǎng)半衰期至2-5分鐘。如果在反應(yīng)混合液中后加輔酶A，將促進(jìn)額外的，次級(jí)發(fā)光（Fraga, 2008）。

在Gold Bio，我們建議用以Yuichi Oba, et al. (2003)為基礎(chǔ)的熒光素酶分析buffers：

-100mM Tris- HCl(pH7.8)

-5mM MgCl₂

-250 uM CoA

-150 uM ATP(Fraga, 2008)

-150 ug/ml d-Luciferin

一些研究者在分析buffer中也加入其它成份，比如DTT或EDTA(Steghans, 1998)。根據(jù)您具體需要可以適當(dāng)調(diào)整分析buffer。為得到zuijia結(jié)果，根據(jù)您具體細(xì)胞我們建議先做一個(gè)動(dòng)力學(xué)曲線的初步測(cè)試。

產(chǎn)品具體信息

D-熒光素鉀鹽

4，5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt

KC₁₁H₇N₂O₃S₂

分子量：318.42 g/mol

D-熒光素鈉鹽

4，5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt

NaC₁₁H₇N₂O₃S₂.H₂O

分子量：320.32 g/mol

 

儲(chǔ)存：-20℃避光保存。

 

Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G